Browsing by Author "Pinto, Joana Rita Bichinho"
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- Análise da expressão do OR51E2 no Glioblastoma MultiformePublication . Pinto, Joana Rita Bichinho; Santos, Cecília Reis Alves dos; Gonçalves, Isabel Maria Theriaga Mendes VarandaO glioblastoma multiforme (GBM) é o tumor maligno, do cérebro e do sistema nervoso central, mais comum. A remoção cirúrgica destes tumores, seguida de radioterapia e quimioterapia com temozolomida, constituem a abordagem terapêutica mais usada no tratamento do GBM. No entanto, devido à sua agressividade, a esperança média de vida destes doentes é de, aproximadamente, 15 a 18 meses após o diagnóstico e, mesmo em condições favoráveis, a maioria dos pacientes não ultrapassa os 2 anos. Assim, um conhecimento mais aprofundado deste tipo de tumor e a identificação de alvos terapêuticos alternativos são necessários para melhorar o prognóstico e as taxas de sobrevida dos pacientes. O GBM tem características metabólicas particulares. Tal como na maioria das células cancerígenas, a glicólise prevalece sobre a fosforilação oxidativa como principal fonte de energia, mesmo quando há oxigénio disponível. Essa alteração metabólica designada por Efeito de Warburg, favorece a grande demanda de nucleótidos, aminoácidos e lípidos essenciais para a proliferação celular. Assim, a reversão deste efeito surge como uma abordagem terapêutica promissora no tratamento do GBM. Dados recentes, obtidos a partir de ensaios de microarrays e sequenciação de RNA de GBM, sugerem que estes tumores expressam o recetor olfativo 51E2 (OR51E2), sendo o lactato, um dos produtos da glicólise, um dos ligandos conhecidos deste recetor. Uma vez que o OR51E2, tem sido implicado na modulação da proliferação e invasão noutros tumores, este trabalho pretende investigar a possibilidade do OR51E2 funcionar como sensor de lactato no microambiente tumoral e, desta forma, modelar o metabolismo e reverter o Efeito de Warburg. Os resultados deste estudo confirmaram a expressão do mRNA e da proteína do OR51E2 numa linha de astrócitos normais HASTR/ci35 e em três linhas de GBM, U-87MG, SNB-19 e U-373MG. Procedeu-se também à comparação dos níveis de expressão do OR51E2 em amostras humanas de astrocitomas de diferentes graus (I-IV). Verificou-se que o OR51E2 é expresso, predominantemente, no citosol nas linhas celulares SNB-19 e U-373MG. Assim, a linha SNB-19 foi usada para os restantes ensaios. De acordo com o que seria expectável, as SNB-19, quando sujeitas à privação de oxigénio e glucose, sofrem uma diminuição na viabilidade celular. Para avaliar o possível envolvimento na resposta destas células à hipoxia, o OR51E2 foi silenciado com siRNA. Os resultados obtidos mostraram que o silenciamento do recetor não afeta significativamente a viabilidade celular em condições normais de oxigénio (HG e LG normóxia). Resultados semelhantes foram obtidos sob privação de oxigénio (HG e LG hipóxia). Doseou-se também o lactato extracelular, e não se observaram diferenças significativas entre condições normais de oxigénio (HG e LG normóxia) e de privação de oxigénio (HG e LG hipóxia). Face aos resultados obtidos concluímos que o OR51E2 não medeia a resposta à hipoxia nesta linha celular de GBM.