Browsing by Author "Athayde, Luiza Maria Ferreira Lopes"
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- Desenvolvimento de um modelo ex vivo de envelhecimento em culturas organotípicas de hipocampoPublication . Athayde, Luiza Maria Ferreira Lopes; Bernardino, Liliana InácioA expectativa de vida aumentou consideravelmente nas últimas décadas. Relatórios das Nações Unidas revelam que o número de pessoas com mais de sessenta anos de idade está a aumentar mais rapidamente que em grupos etários mais jovens em todo o mundo. O envelhecimento é um processo fisiológico, com diversos mecanismos que podem desencadear efeitos cruciais no surgimento de doenças neurodegenerativas. A principal característica do envelhecimento é a acumulação de células senescentes, no qual, o stress oxidativo, está implicado diretamente. Diante da complexidade do envelhecimento, é imprescindível a compreensão dos mecanismos moleculares relativos a esse processo. Atualmente, os modelos experimentais utilizados para investigar o envelhecimento cerebral são in vitro e in vivo, que por sua vez, trazem algumas desvantagens. Como tal, o objetivo deste trabalho foi estabelecer um novo modelo ex vivo de envelhecimento cerebral, utilizando o composto terc-butil hidroperóxido (t-BHP) em culturas organotípicas de hipocampo de murganhos C57BL/6J com 6 a 9 dias de idade. As culturas foram expostas a um tratamento subcrónico com t-BHP com o objetivo de induzir stress oxidativo, e consequentemente, a senescência. A indução de senescência celular foi avaliada através do ensaio da ßgalactosidase, enquanto a viabilidade celular foi avaliada através do ensaio de lactato desidrogenase (LDH). A expressão dos marcadores de senescência (SA-ß-gal), stress oxidativo (SOD2), sobrevivência e atividade neuronal (NeuN e DCX), foram analisados por Western blotting. Verificou-se que o t-BHP (10µM e 25µM) não induziu um aumento na atividade da ß-galactosidase, sugerindo que este tratamento não foi capaz de induzir senescência. Contudo, o tratamento com 25µM t-BHP induziu morte celular avaliada através do ensaio LDH. Foi verificada uma tendência no aumento da expressão de SOD2 (com a concentração de 25µM t-BHP), e quanto à sobrevivência e dinâmica neuronal, não foram observadas alterações significativas. Em suma, os resultados sugerem que a indução da senescência, nos parâmetros utilizados neste estudo, não foi suficiente para o estabelecimento do modelo. Para se alcançarem conclusões mais robustas, será necessário realizar-se estudos adicionais de mecanismos de stress oxidativo e senescência celular em culturas organotípicas de hipocampo.
