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- Determinação de opiáceos em sangue total com recurso a sistemas de microextração e cromatografia gasosa acoplada à espetrometria de massa triplo quadrupoloPublication . Prata, Margarida de Jesus; Alba, Maria Eugénia Gallardo; Rosado, Tiago Alexandre PiresO presente relatório de estágio encontra-se dividido em três capítulos que descrevem a experiência profissionalizante nas áreas de Investigação, Farmácia comunitária e Farmácia Hospitalar, respetivamente. O Capítulo 1 aborda o desenvolvimento de um método para determinação de morfina (MOR), codeína (COD) e 6-monoacetilmorfina (6-MAM) em sangue total, utilizando a microextração em seringa empacotada (MEPS) e cromatografia gasosa acoplada à espetrometria de massa triplo quadrupolo (GC-MS/MS). Este trabalho foi desenvolvido no Centro de Investigação em Ciências da Saúde da Universidade da Beira Interior. O procedimento de extração da amostra foi previamente otimizado recorrendo ao planeamento fatorial fracionado (2k-1), ferramenta estatística aplicada ao processo decisório que avalia de forma multivariada os fatores envolvidos na extração (derrames, quantidade de soluções de lavagem e eluição, número de lavagens do adsorvente e número de ciclos de eluição). As condições finais otimizadas foram: número de aspirações (20), quantidade de ácido fórmico utilizado na solução de lavagem (3,36%), número de lavagens do adsorvente (1), quantidade de hidróxido de amónio utilizado na solução de eluição (2,36%) e número de ciclos de eluição (11). Utilizando um volume de amostra de 250µL, o método foi validado segundo as normas internacionalmente aceites, da Food and Drug Administration (FDA) e do Scientific Working Group of Forensic Toxicology (SGWTOX), para a validação de métodos bioanalíticos. Os parâmetros estudados incluíram a seletividade, modelo de calibração e linearidade, limite de deteção (LOD), limite de quantificação (LLOQ), precisão, exatidão, integridade de diluição e recuperação. O método mostrou-se linear no intervalo de concentrações de 5 a 1000ng/mL, com coeficientes de determinação (R2) superiores a 0,99 para todos os analitos de interesse. As precisões e exatidões intra e interdia situaram-se em conformidade com os critérios supramencionados, ou seja, apresentando coeficientes de variação (CV) inferiores a 15% e BIAS dentro do intervalo ±15% da concentração teórica. Em relação às recuperações absolutas obtidas, os valores variam entre 6% e 23%. O método validado mostrou ser aplicável à análise de amostras reais, sendo uma ferramenta vantajosa para a triagem destes compostos na área da toxicologia. Salienta-se que este é o primeiro estudo que combina a GC-MS/MS com a MEPS para a determinação destes compostos em amostras de sangue. O Capítulo 2 é dedicado ao estágio na vertente de Farmácia Comunitária realizado na Farmácia Costa. Por fim, o Capítulo 3 descreve o estágio na vertente de Farmácia Hospitalar realizado no Hospital de Sousa Martins. Em ambos os capítulos, são abordadas as atividades desempenhadas durante o período de estágio, os conhecimentos adquiridos, bem como o enquadramento legislativo destas duas áreas da profissão farmacêutica.
- O ensino do português e os mediadoresPublication . Amaral, Ana Paula Almeida; Sardinha, Maria da Graça Guilherme de AlmeidaO trabalho apresenta uma reflexão sobre a prática pedagógica incidindo nas competências encontradas em Perrenoud, que, posteriormente localizámos nos planos de aula apresentados e selecionados segundo critérios devidamente justificados. Os objetivos elencados sustentam todo o trabalho desenvolvido. Referimos ainda a importância atribuída aos manuais, sinalizámos igualmente as competências já referidas.
- Fuel Burn Benefits of Altitude Optimization Strategies in the Cruise Phase of LongHaul FlightsPublication . Silva, JorgeThis paper focuses on the vertical profile of the cruise phase of long-haul commercial flights covering legislation, operational standards, communications, surveillance, flight planning and performance aspects. Two case studies are presented: the first one describes and compares an actual vertical profile of a flight and an optimised one, with detailed calculations as well as results estimation; the second one compares two vertical profile optimization procedures strategies. Small modifications in how cruise phase of a flight is operated airlines can achieve cost reductions, mitigate environmental impacts, and contribute to airspace efficiency.
- Ações da vitamina D na regulação da Regucalcina no cancro da próstataPublication . Rodrigues, Ana Margarida Pereira; Batista, Cláudio Jorge Maia; Socorro, Sílvia Cristina da Cruz MarquesCancro da próstata é o segundo cancro maligno mais diagnosticado na população masculina. Baixos níveis de vitamina D tem sido associados ao desenvolvimento e/ou progressão do cancro da próstata. Vitamina D pode ser produzida na pele, durante a exposição solar, ou provinda da dieta. Calcitriol, a forma ativa da vitamina D, quando ligada ao seu recetor, regula a expressão de uma variedade de genes que estão associados com a homeostase do cálcio e também associados ao crescimento celular, diferenciação e apoptose. Esta hormona é então um regulador da homeostase de cálcio intracelular, mas também um modulor efetivo da proliferação celular e da diferenciação em diferentes tipos de células, como é o caso do cancro da próstata. O desequilíbrio entre a morte celular e a proliferação, está na base da carcinogénese e a transformação maligna das células tem sido associada a alterações na sinalização de cálcio. Regucalcina é uma proteína que tem como papel importante na manutenção da homeostase de cálcio e também na regulação da expressão de algumas proteínas importantes nas vias de sinalização intracelular. Estudos do nosso grupo comprovam que a regucalcina está subexpressa no cancro da próstata. Este projeto de investigação tem como objetivo verificar o efeito anticancerígeno da vitamina D através da regulação da regucalcina. Para isso, utilizou-se a técnica de PCR em tempo real para avaliar a expressão da regucalcina nas células PNT1A, LnCap e PC3 estimuladas com a vitamina D. Nos resultados obtidos, nas linhas PNT1A e LnCaP observou-se uma diminuição significativa da expressão do mRNA regucalcina enquanto que na linha PC-3 houve uma aumento da expressão. Concluímos que possivelmente a vitamina D tem ações anticancerígenas apenas em estados tardios do cancro da próstata, aumentando a expressão da regucalcina e assim regredir a progressão do cancro.
- Desenvolvimento de um método para a determinação de metadona e do seu metabolito EDDP em amostras de fluido oral com recurso a manchas de saliva seca e GC/MS/MSPublication . Ribeiro, Andreia Sofia Ferreira; Rosado, Tiago Alexandre Pires; Alba, Maria Eugénia GallardoO relatório de estágio aqui apresentado está inserido na unidade curricular “Estágio” do Mestrado Integrado em Ciências Farmacêuticas e encontra-se divido em três capítulos. O primeiro capítulo é referente ao estágio curricular em Farmácia Hospitalar, realizado nos Serviços Farmacêuticos do Centro Hospitalar Universitário Cova da Beira. Já o segundo capítulo aborda a minha experiência durante o estágio em Farmácia Comunitária e decorreu na Farmácia Moderna de Castro Daire. Em ambos são abordadas todas as atividades desenvolvidas, com destaque especial para o papel do farmacêutico, que desempenha cada vez mais um papel fundamental ao nível dos cuidados de saúde e promoção da saúde pública. Por último, no terceiro capítulo é descrito todo o trabalho de investigação laboratorial desenvolvido no Centro de Investigação em Ciências da Saúde da Universidade da Beira Interior. O presente trabalho descreve o desenvolvimento e validação de um novo método analítico para a determinação de metadona e do seu principal metabolito EDDP em amostras de fluido oral, com recurso a Dried Saliva Spots (DSS) e cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massa em tandem (GC-MS/MS). O procedimento de extração da amostra consistiu na aplicação de uma amostra de fluido oral (50 µL) num cartão de papel de filtro, seguindo-se da adição de isopropanol e agitação. Posteriormente, para obtenção do extrato, foi necessário ocorrer centrifugação e concentração. Decorrido este pré-tratamento, o extrato foi injetado na coluna cromatográfica, sendo que neste trabalho, para favorecer a separação dos analitos, foi utilizada uma coluna de fenilmetilsiloxano a 5%. Uma vez que era desejado que o sinal obtido apresentasse o menor ruído possível, todas as condições cromatográficas e parâmetros de espectrometria de massa foram otimizados. Relativamente à validação do método foram utilizados critérios aceites internacionalmente para validação de métodos bioanaliticos, sendo que os parâmetros estudados incluíram o estudo da seletividade, linearidade, limites de deteção (LOD) e quantificação (LLOQ), precisão e exatidão, estabilidade, fatores de diluição e recuperação. O procedimento foi linear para o intervalo de concentrações de 10 a 250 ng/mL para ambos os compostos, com coeficientes de determinação (R2) superiores a 0,99. A precisão intra- e interdia foram inferiores a 15% para todos os analitos a todas as concentrações estudadas, enquanto a exatidão permaneceu dentro de um intervalo de ± 15%. As recuperações variaram de 45 a 74%. Utilizando apenas 50 µL de amostra foi possível obter LODs baixos (5 ng/mL). Todos os parâmetros estudados obedeceram aos critérios definidos e o método permitiu a determinação bem-sucedida da metadona e do seu principal metabolito em amostras de fluído oral de indivíduos em terapia de substituição/manutenção de opiáceos.