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- Sexuality, Intimacy and Sexual Behavior of Elderly People with Dementia in Residential CarePublication . Pinho, Sarah Angélica Almeida Simões; Pereira, Henrique Marques; Afonso, Rosa Marina Lopes Brás MartinsIn the scope of the Master's Degree in Clinical and Health Psychology, this dissertation is organized in an article format, which, as indicated in the Master's Degree in Psychology regulation of University of Beira Interior, is written similar to a publishable article in a journal scientific journal. This scientific paper intends to describe the research carried out in the academic year 2017/2018 in the Dissertation Curricular Unit. The research presents a psychological investigation of an empirical study theoretically based which contributes in a pertinent way to the area of Clinical Psychology and Health. Sexuality is considered a dimension that concerns human health and is present in all ages. It has profound implications not only on biological and psychological aspects, but also on social and cultural dimensions. Likewise, the significant increase in population aging and the expected increase in dementia cases have and will have a profound impact on society, affecting not only the individual diagnosed with dementia but also their caregivers and loved ones. The theme of sexuality in the third age, particularly those with dementia, is not a subject commonly investigated by psychologists in Portugal. The objective of this study is twofold: (1) it aims to explore and understand the perspectives of family health professionals and caregivers regarding sexuality, intimacy and sexual behavior in elderly people with dementia, and (2) explore how participants manage the sexual needs of residents with dementia in a residential care context The current research used a mixed methodology approach. Two studies were conducted, one using quantitative and the other quantitative research tools. In Study 1, face-to-face in-depth interviews were conducted with a total of 32 participants. In Study 2, 69 health professionals and 40 family caregivers participated, responding exclusively to an online questionnaire. The qualitative analysis data was analyzed using thematic analysis to help identify repeated patterns of meaning in the dataset. As for the quantitative data, these were subjected to a statistical analysis. Qualitative results demonstrate that: (1) participants identified the presence of sexuality, intimacy and sexual behavior in elderly people with dementia, that result of a physiological need and should be faced as natural/normal as possible; (2) Sexuality is mostly considered as an important manifestation of love, affectivity and proximity, rather than exclusive presence of sexual intercourse; (3) Participants hypothesized that the social beliefs influence on mentality and education given to date and that has an influential factor in the rooting of existing taboos about the subject of sexuality in the third age, specifically in dementia; (4) Participants refer to be attentive and try to deal in the most natural and discreet way to the to the needs of the elderly concerning sexual behaviors; (5) It is perceived a general limitation on training and institutional orientations barriers, especially if the elderly manifests inappropriate sexual behaviors and (6) Decision-making is determined by the elderly if he reunites the ability and capacity to manifests what his wishes are, without it calling into question his rights. As for the quantitative research it is concluded that:(1) high percentage of participants disagree with the inference that as people age, they become less interested in sex and on sexual expression (2) they should have the freedom to express themselves sexually and intimately in a natural and spontaneous way. However, there is felt a (3) lack of time that the caregivers dedicate to respond to the situations of sexuality and intimacy (4) expressing concerns in the responses of the partners as well as the family caregivers to the sexual expressions. In this sense, and in accordance with the results obtained, it is necessary to sensitize governmental and institutional entities to establish policies and standards of orientation for those dealing with this aging population that have sexual needs. Both health professionals and family caregivers would benefit from training to better understand sexual expression in dementia. This training would improve both the way of acting and making ethical decisions, as it would contribute to the demystification of taboos and promotion of quality of life in the elderly. It is also essential to consider policies of social inclusion, which allow debates and normalization of the topic of sexuality in elderly people with dementia. In the final section of this dissertation, the annexes are presented, including all the material used during the investigation, such as the theory underlying the knowledge base of the analyzed phenomenon that provided theoretical and empirical insights and a better understanding of the analysis theme.
- Modulatory effect of innovative antioxidant formulation on Parkinson’s disease neurodegeneration and neurogenesisPublication . Fiadeiro, Mariana Bernardo; Cristovão, Ana Clara Braz; Bernardino, Liliana InácioParkinson’s disease (PD) is a multifactorial neurological disorder characterized by increased levels of oxidative stress. Neurogenesis, a process of generating functional neurons, is also affected in PD. Inline, antioxidant compounds may be used to prevent neurodegeneration and modulate neurogenesis. Several antioxidant compounds exhibit low solubility requiring the use of vehicles that, in turn, may be neurotoxic. Therefore, the development of new delivery formulations capable to overcome these problems and simultaneously prompt the concentration of antioxidant compounds in the brain is urgent. Herein, the cytotoxicity of [Chol][Apo] was tested in N27 neuronal cell line and Subventricular Zone (SVZ) neural stem cells (NSCs) primary cultures, and its capability to prevent dopaminergic neurodegeneration in experimental models of PD and modulate neurogenesis process. The results showed that [Chol][Apo] induced a low toxic effect on dopaminergic neurons and additionally, it was capable to significantly reduce in vitro neuronal death induced by 6-OHDA. Moreover, the results reveal that the range of [Chol][Apo] concentrations used did not induce necrosis/late-apoptosis to NSCs from the SVZ. NSCs and neuroblasts proliferation was not affected compared with control and the same was verified for neuronal differentiation. In vivo, the infusion of 15 µg/µL/h of [Chol][Apo] in the ventricle during 7 days significantly reduced the neurotoxic effect of 6-OHDA on DA neurons in the SN. Furthermore, there is a tendency that suggests that the new antioxidant formulation may increase neuroblast population in healthy and in 6-OHDA-treated mice. On the contrary, [Chol][Apo] did not alter the number of proliferating neuroblasts in the SVZ of healthy and 6-OHDA-treated mice. The results showed an increase of proliferating mature neurons in the ST of 6-OHDA-treated mice. Altogether, these results opened the possibility to further investigate the role of [Chol][Apo] on PD neurodegeneration and on neurogenesis and its development as a new therapeutic approach to halt PD progression.
- Terapia Génica MitocondrialPublication . Melo, Ana Cristina Candeias; Costa, Diana Rita BarataA mitocôndria é um organelo celular que possui o seu próprio genoma, o ADN mitocondrial (ADNmt). Apesar de bastante pequeno quando comparado com o ADN nuclear (ADNn), mutações ao nível do ADNmt são bastante frequentes devido à falta de mecanismos de proteção e de reparação, provocando disfunções no mecanismo de fosforilação oxidativa, o que afeta essencialmente órgãos e tecidos com grande demanda de energia, como é o caso dos músculos e do cérebro. Dado que os métodos convencionais de tratamento destas desordens mitocondriais se têm revelado ineficazes, torna-se crucial o desenvolvimento de protocolos terapêuticos inovadores e eficientes, dos quais se destaca a terapia génica mitocondrial (TGM). Com este projeto tentamos desenvolver um novo sistema capaz de entregar de forma eficaz o ADN plasmídico (ADNp) à mitocôndria para uma possível utilização em TGM. Assim, o presente trabalho pode ser dividido em duas partes principais: uma primeira parte que inclui a síntese e caracterização de nanosistemas à base de ADNp e do polímero polietilenimina (PEI), e incorporação de compostos mitocondriotrópicos capazes de direcionar os sistemas para a mitocôndria; e uma segunda parte que integra estudos in vitro para testar a capacidade de transfeção celular das nanopartículas e a sua afinidade de direcionamento para a mitocôndria. Os sistemas em estudo demonstraram ser biocompatíveis, com eficiências de encapsulação de ADNp elevadas, apresentam forma esférica ou oval com tamanhos inferiores a 300 nm e possuem potenciais zeta positivos, o que os torna adequados para uso em protocolos de TGM. Os sistemas foram internalizados nas células e direcionados para a mitocôndria com sucesso. Estes resultados demonstram que a síntese de novos vetores com afinidade mitocondrial pode constituir um grande avanço na correção de defeitos mitocondriais, oferecendo uma nova estratégia terapêutica no combate a diversas patologias como o cancro e doenças neuromusculares e neurodegenerativas.
- DNA minicircular multigénico com potencial ação terapêutica no cancro do colo do úteroPublication . Eusébio, Dalinda Isabel da Silva; Sousa, Ângela Maria Almeida de; Sousa, Fani Pereira deO vírus do Papiloma Humano (HPV) é o principal fator de risco para o cancro do colo do útero, uma vez que as oncoproteínas E6 e E7 comprometem a expressão ou a atividade das proteínas supressoras de tumor p53 e pRb. Muitas abordagens terapêuticas têm sido consideradas ineficazes, existindo a necessidade de desenvolver novas estratégias como a terapia génica. O DNA minicircular (mcDNA) surge como um vetor inovador, que resulta de um processo de recombinação in vivo, no qual um plasmídeo parental (PP) leva à formação de um mini-plasmídeo (mP) que contém as sequências procariotas, e um mcDNA que contém apenas a cassete de expressão eucariótica. O mcDNA apresenta uma elevada eficiência de transfecção devido ao seu tamanho reduzido, sendo também considerado uma terapia mais segura do que o DNA plasmídico. Assim, o presente trabalho tem como objetivo, numa primeira fase, produzir e purificar um vetor de mcDNA que codifica o gene p53 para aplicação em estudos in vitro. Com o intuito de isolar a isoforma superenrolada (sc) do mcDNA-p53, a partir de quantidades residuais de PP e impurezas bacterianas, foram explorados monolitos com ligandos de L-histidina e 1-benzil-L-histidina, assim como uma coluna cromatográfica de filtração em gel (Sephacryl S-1000 SF). A força iónica e o pH dos passos de ligação e eluição foram ajustados ao longo das estratégias de purificação. Os resultados indicaram que a filtração em gel foi a melhor abordagem para o isolamento da biomolécula de interesse, assegurando um grau de pureza superior e obtenção de maior quantidade de amostra. Posteriormente, foram realizados estudos de transfecção in vitro em células HeLa com os vetores PP-p53 e mcDNA-p53, tendo-se verificado a internalização celular de ambos os vetores. Para além disto, foi confirmada a transcrição do gene de interesse p53 e detetada a tradução na respetiva proteína alvo, assim como foi realizada a sua quantificação. Por último, de modo a avaliar a ação terapêutica do gene p53 codificado nestes vetores, foram realizados ensaios de proliferação celular, citotoxicidade e apoptose. De um modo geral, todos os estudos in vitro realizados sugeriram que o mcDNA-p53 apresenta resultados mais promissores, com potencial para ser utilizado numa nova estratégia terapêutica para o cancro do colo do útero. Numa segunda fase, o presente trabalho também teve como objetivo a construção de um vetor de mcDNA multigénico, com clonagem de dois genes terapêuticos no PP (gene p53 e gene pri-miRNA-375), visando uma potencial aplicação terapêutica combinada e mais eficaz no cancro do colo do útero.
- Sépsis bacteriana no contexto AngolanoPublication . Felisberto, Joaquim Paulo; Monteiro, Maria de Lurdes Paiva; Moreira, André Ferreira; Miguel, Sónia Alexandra PereiraSépsis é uma palavra derivada do grego [s????], a qual significa a decomposição de materiais orgânicos que pode ocorrer por animais, plantas ou bactérias. A sépsis é responsável por 15 a 20% de todas as mortes nos países em vias de desenvolvimento e por mais de 1,5 milhões mortes de recém-nascidos e crianças a cada ano. Como condição médica, a sépsis é mais letal que um acidente vascular cerebral, apresentando taxas de mortalidade e morbidade próximas a 80% em países em vias de desenvolvimento. Além disso, quando comparado com a incidência de outras principais causas de morte, a incidência da sépsis tem vindo a aumentar. De facto, a incidência da sépsis aumentou de 1 672 casos por 100 000 habitantes em 2008 para 2 618 casos em 2012. A sépsis é uma doença infeciosa de etiologia variada (bacteriana, viral, fúngica ou até mesmo por protozoários), sendo que a etiologia mais frequente é a bacteriana. A transmissão da sépsis pode ocorrer por via endógena (infeção a partir de microrganismos colonizadores, microrganismos da flora normal); e/ou exógena (infeção a partir de um agente infecioso externo tendo penetrado no hospedeiro). A manifestação da sépsis está associada aos sinais e sintomas da infeção primária. O diagnóstico desta cultura é normalmente realizado recorrendo a hemocultura. O tratamento proposto, que deve ocorrer nas primeiras 6 a 8 horas após a identificação do doente com sépsis, inclui a reposição volumétrica vigorosa a cada 30 minutos conjugada com a administração de antibióticos. Os antimicrobianos são os agentes mais específicos e acessíveis para o tratamento do doente com sépsis, embora apenas representem uma abordagem parcial do problema. Uma das alternativas exploradas para aumentar a eficiência dos antibióticos é a estimulação da imunidade inata do doente, pelo aumento do número de leucócitos. Os dados descritos na literatura indicam que melhores taxas de sobrevivência em doentes com sépsis poderão ser atingidas com tratamentos adicionais aos convencionais agentes antimicrobianos. A sépsis é uma das principais causas de morbilidade e mortalidade em todo o mundo, particularmente em Angola. Em Angola, poucos hospitais públicos estão preparados para a realização de hemoculturas automatizadas, sendo a técnica manual a mais utilizada, o que torna o diagnóstico demorado e pouco fidedigno pelo índice de contaminação do material. Devido a este facto, é essencial o desenvolvimento de um conjunto de medidas para o reconhecimento e gestão precoce da sépsis refletindo o nível primário, secundário e terciário de cuidados.
- Produção e caraterização de filmes bioativos à base de nanocelulose por incorporação de óleo essencial de cravinho-da-Índia e eugenolPublication . Lopes, Vasco Miguel Pires; Amaral, Maria Emília da Costa Cabral; Simões, Rogério Manuel dos SantosA manutenção da segurança alimentar e a garantia da qualidade são cruciais para a indústria alimentar. A necessidade de materiais de embalagem que possam aumentar consideravelmente as propriedades de barreira, prolongar a vida útil em prateleira e biodegradáveis fazem da nanocelulose um biomaterial com um tremendo potencial. Um dos materiais mais promissores para embalagens alimentares são materiais à base de nanocelulose com propriedades antibacterianas, melhores propriedades mecânicas e de barreira e que sejam biodegradáveis. No presente trabalho, a celulose nanofibrilada (CNF) ou nanocelulose foi produzida a partir de duas pastas comerciais branqueadas de Eucalyptus globulus, com caraterísticas iniciais distintas. Estas foram sujeitas a um tratamento químico de oxidação mediada por TEMPO e tratamentos mecânicos, ambos contribuem para a desconstrução da parede celular, libertando nanofibrilas e formando suspensões de CNF. Estes materiais foram caraterizados de acordo com o teor de grupos carboxílicos, viscosidade intrínseca, rendimento de fibrilação, potencial zeta e propriedades reológicas, tendo em conta o seu estado face aos tratamentos. Produziram-se filmes de CNF pelo processo de evaporação de solvente, com e sem incorporação de óleo essencial de cravinho, ou eugenol. Os óleos essenciais representam um “ingrediente” interessante para ser usado em embalagens alimentares, principalmente devido à sua origem natural e às suas propriedades funcionais (antioxidante e antimicrobiana). Os filmes produzidos foram analisados por diferentes métodos de caraterização e análise, tais como, o FTIR, a morfologia da estrutura interna por SEM, as propriedades mecânicas e de barreira, a atividade antioxidante e antimicrobiana. Os resultados mostraram que o sistema TEMPO/NaClO/NaBr produziu pastas altamente oxidadas, com viscosidades intrínsecas baixas, resultando em baixos graus de polimerização. As suspensões de CNF produzidas apresentaram elevados rendimentos em fibrilação, potenciais zeta muito negativos e ainda caraterísticas reológicas distintas em parte relacionadas com a origem das pastas, ao sulfito e ao sulfato. Os filmes de CNF incorporados com CLO e EU possuem boas propriedades mecânicas (resistência à tração de 60 MPa, 5% de alongamento, módulo de elasticidade de 6000 MPa). A conjugação AK1/EU e AK2/CLO revelam ser mais eficazes à razão de transmissão de moléculas de vapor de água, melhores propriedades de barreira. As propriedades morfológicas da estrutura dos filmes demonstraram um elevado empacotamento da estrutura de todos os filmes, podendo contribuir para as baixas concentrações obtidas nos ensaios de libertação e a ineficácia contra a inibição do crescimento microbiano, quando estes compostos antimicrobianos estão incorporados na suspensão de nanocelulose.