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- Estudo da influência do ácido retinóico no acidente vascular cerebralPublication . Pouso, Manuel António do Rosário; Oliveira, Maria Elisa Cairrão RodriguesO acidente vascular cerebral constitui uma das principais causas de morte e de invalidez em todo o mundo. A artéria cerebral média deriva da artéria carótida interna e é responsável pela irrigação de diversas áreas do cérebro, estando associada à maioria dos quadros clínicos de acidente vascular cerebral. Embora represente apenas 2% da massa corporal, o cérebro humano utiliza cerca de 20% da energia gerada pelo organismo. Desta forma, é de extrema importância manter os níveis de perfusão adequados, uma vez que é através do fluxo sanguíneo que o cérebro recebe os níveis corretos de oxigénio e nutrientes para o desempenho das suas funções. As células musculares lisas são os principais componentes celulares das artérias sendo responsáveis pela alteração do diâmetro das mesmas, através de mecanismos de contração e relaxamento, possibilitando a regulação do fluxo sanguíneo em função das necessidades energéticas do cérebro. Assim, o principal objetivo deste trabalho é analisar o efeito do ácido retinóico, um derivado da vitamina A com propriedades vasoativas e anti-inflamatórias, na regulação da função vascular mediada por neurónios e astrócitos após um evento isquémico. Foram isolados explantes da artéria cerebral média de ratos Wistar e aderidos a placas de culturas revestidas com colagénio. A partir dessas artérias foram obtidas células do músculo liso tendo estas sido expostas a meios condicionados por co-culturas de neurónios e astrócitos, previamente incubadas com diferentes concentrações de ácido retinóico e submetidas a isquemia. Através da técnica de Planar Cell Surface Area, foi analisada a resposta das células do músculo liso ao agente contráctil, noradrenalina, e ao agente relaxante, nitroprussiato de sódio. A utilização deste derivado da vitamina A modulou o secretoma de neurónios e astrócitos submetidos a ambiente isquémico. A concentração de 5 µL de ácido retinóico apresenta os resultados mais promissores, promovendo o relaxamento das células musculares lisas quando expostas ao agente contráctil utilizado, mantendo o mesmo perfil após a adição do agente vasodilatador. Assim, estes dados indicam que a utilização de ácido retinóico apresenta benefícios terapêuticos, após um acidente vascular cerebral, promovendo o relaxamento das células do músculo liso e aumentando, assim, os níveis suprimento sanguíneo.
- Development of dual-crosslinked Pluronic F127/Chitosan injectable hydrogels incorporating graphene nanosystems for breast cancer photothermal therapy and antibacterial applicationsPublication . Pouso, Manuel António do Rosário; Melo, Bruna L.; Gonçalves, Joaquim; Mendonça, António; Correia, I.J.; Diogo, Duarte de MeloNanomaterials with responsiveness to near-infrared light can mediate the photoablation of cancer cells with an exceptional spatio-temporal resolution. However, the therapeutic outcome of this modality is limited by the nanostructures’ poor tumor uptake. To address this bottleneck, it is appealing to develop injectable in situ forming hydrogels due to their capacity to perform a tumor-confined delivery of the nanomaterials with minimal off-target leakage. In particular, injectable in situ forming hydrogels based on Pluronic F127 have been emerging due to their FDA-approval status, biocompatibility, and thermosensitive sol–gel transition. Nevertheless, the application of Pluronic F127 hydrogels has been limited due to their fast dissociation in aqueous media. Such limitation may be addressed by combining the thermoresponsive sol–gel transition of Pluronic F127 with other polymers with crosslinking capabilities. In this work, a novel dual-crosslinked injectable in situ forming hydrogel based on Pluronic F127 (thermosensitive gelation) and Chitosan (ionotropic gelation in the presence of NaHCO3), loaded with Dopamine-reduced graphene oxide (DOPA-rGO; photothermal nanoagent), was developed for application in breast cancer photothermal therapy. The dual-crosslinked hydrogel incorporating DOPA-rGO showed a good injectability (through 21 G needles), in situ gelation capacity and cytocompatibility (viability > 73 %). As importantly, the dual-crosslinking improved the hydrogel’s porosity and prevented its premature degradation. After irradiation with near-infrared light, the dual-crosslinked hydrogel incorporating DOPA-rGO produced a photothermal heating (ΔT ≈ 22 °C) that reduced the breast cancer cells’ viability to just 32 %. In addition, this formulation also demonstrated a good antibacterial activity by reducing the viability of S. aureus and E. coli to 24 and 33 %, respectively. Overall, the dual-crosslinked hydrogel incorporating DOPA-rGO is a promising macroscale technology for breast cancer photothermal therapy and antimicrobial applications.