Microarray based identification of estrogen and androgen responsive genes in rat choroid plexus

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Regulação da apoptose por hormonas sexuais no plexo coroide

Publication . Costa, Ana Raquel Ferreira da; Santos, Cecília Reis Alves dos; Gonçalves, Isabel Maria Theriaga Mendes Varanda

A morte celular mediada pela disfunção mitocondrial pode estar associada com a acumulação de péptido β-amiloide (a-beta), que é um dos principais fatores causadores da doença de Alzheimer. O plexo coroide (CP) tem um papel fundamental na remoção do a-beta do líquido cefalorraquidiano (CSF), evitando a sua acumulação e consequente morte neuronal. No entanto, o a-beta pode também induzir a apoptose nas células epiteliais do plexo coroide, com a consequente redução da eficiência da barreira deste tecido. As hormonas sexuais regulam a acumulação de a-beta, reduzindo os seus níveis e, consequentemente, a apoptose. O CP é um alvo reconhecido das hormonas sexuais, e estas hormonas afetam a expressão de vários genes da via apoptótica e, portanto, podem afetar a apoptose induzida por a-beta nestas células. O objetivo deste trabalho foi analisar a expressão de genes apoptóticos no CP de rato e estudar o efeito das alterações nos níveis de hormonas esteroides na expressão destes genes, o que pode ter um papel importante na neuroproteção relativa ao péptido β-amiloide e, portanto, na doença de Alzheimer. Começámos por analisar a expressão de vários genes da cascata apoptótica (Casp2, Casp3, Cflar, Casp9, BCl2l1, Mdm4p53, GzmC e Cox4i1), por PCR, na linha celular de CP, Z310, e no plexo coroide de rato, confirmando-se a sua expressão neste epitélio. Além disso, as proteínas de apoptose caspase-3 e Cox4 também foram localizadas por imunohistoquímica e whole-mount (IHC de fluorescência) no citoplasma das células do CP de rato. A expressão de BCl2l1, Mdm4p53, Casp2, Cflar e Casp9 foi comparada por real-time PCR por meio do qual foi possível confirmar que estes genes são diferencialmente expressos entre animais machos e fêmeas Sham e OOX e OVX, respetivamente. A partir desta análise, podemos concluir que a apoptose no CP está sujeita a regulação pelas hormonas sexuais em ratos machos e fêmeas. Estão a decorrer estudos, em células de CP, para analisar o impacto dos níveis hormonais na apoptose induzida pelo a-beta.

2013-06Master thesis

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