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Evaluation of the antioxidant action of the G protein-coupled estrogen receptor
| datacite.subject.fos | Engenharia e Tecnologia::Bioquímica | por |
| dc.contributor.advisor | Baltazar, Graça Maria Fernandes | |
| dc.contributor.author | Bernardino, Ana Carolina de Matos | |
| dc.date.accessioned | 2020-12-18T11:10:06Z | |
| dc.date.available | 2023-09-22T00:30:22Z | |
| dc.date.issued | 2020-10-19 | |
| dc.date.submitted | 2020-09-21 | |
| dc.description.abstract | The brain is characterized by a high metabolism and contains several easily oxidizable substances such as amines and lipids, resulting in exposure to high levels of oxidative stress. In Parkinson's disease (PD), oxidative stress has been shown to be correlated with lipid peroxidation, inflammation, mitochondrial dysfunction and aggregation of a-synuclein (asyn). This demonstrates that oxidative stress can be one of the triggers of Parkinson's disease, as it is capable of inducing a series of pathogenic mechanisms characteristic of the disease, contributing to its progression. In this sense, the identification of mechanisms that help reducing oxidative stress may be an interesting strategy for controlling the progression of the disease. Since 17ß-estradiol exerts neuroprotective functions and has proved beneficial effects on several mechanisms such as neuroinflammation, excitotoxicity, among others, we assessed whether the selective activation of the G protein-coupled estrogen receptor (GPER), characterized by being involved in rapid non-genomic actions of 17ßestradiol, can exert a neuroprotective effect associated with the modulation of oxidative stress. With this objective, we developed an in vivo study with mice injected with 6-OHDA, which were later submitted to subcutaneous or intranasal treatment with the GPER agonist, G1. We evaluated how the selective activation of the receptor can contribute to the reversion of oxidative stress. To this end, several behavioral tests were performed to evaluate motor function, such as Grip Test, Rotarod and Open Field Test, and relative mRNA levels of antioxidant enzymes were measured by real-time PCR (RT-PCR). From the behavioral tests, it was possible to conclude that the 6-OHDA-injection was not capable of affecting motor behavior, since the results obtained with the Rotarod test, and the total distance travelled obtained with the Open field Test did not present significant differences. On the other hand, it was possible to observe that the parameters related with anxious behavior were increased in animals injected with 6-OHDA, when compared with the control group. Therefore, it can be concluded that the toxin had no effect at the level of motor behavior, but induced changes in non-motor domains. Regarding the expression of antioxidant enzymes, although not significant, an increase in the mRNA levels of Gpx4 and Nrf2 was observed in 6-OHDAinjected mice. This increase suggests a protective mechanism aiming to limit oxidative stress. However, further studies are needed to confirm this hypothesis. Our results have shown effects exercised by the G1, when administered by the two delivery approaches. However, it was not possible to conclude whether the two types of G1 delivery have an antioxidant effect in the presence of a dopaminergic insult. In this sense, further studies would be necessary to confirm whether GPER activation is capable of modulating oxidative stress and whether this effect is related to its currently recognized neuroprotective effects. | eng |
| dc.description.abstract | O cérebro caracteriza-se por apresentar um elevado metabolismo, e contém várias substâncias facilmente oxidáveis, tais como aminas e lípidos, o que resulta numa exposição a elevados níveis de stress oxidativo. Foi demonstrado que na doença de Parkinson (DP), o stress oxidativo está correlacionado com a peroxidação lipídica, inflamação, disfunção mitocondrial e agregação da a-synucleína (a-syn). Isto demonstra que o stress oxidativo pode ser um dos desencadeadores da doença de Parkinson, por ser capaz de induzir uma série de mecanismos patogénicos característicos da doença, contribuindo de forma crucial para a sua progressão. Neste sentido, a identificação de mecanismos que ajudem a reduzir o stress oxidativo podem ser estratégias interessantes para o controlo da progressão da doença. Uma vez que o 17ß-estradiol foi classificado como neuroprotetor e já demonstrou efeitos benéficos em diversos mecanismos como neuroinflamação, excitotoxicidade, entre outros, fomos avaliar se a ativação seletiva do recetor de estrogénios acoplado à proteína G (GPER), caracterizado por estar envolvido em ações não genómicas rápidas do 17ßestradiol, pode exercer um efeito neuroprotetor associado à modulação do stress oxidativo na DP. Com este objetivo, desenvolvemos um estudo in vivo com murganhos injetados com 6-OHDA, que foram, posteriormente, submetidos a tratamento subcutâneo ou intranasal com um agonista do recetor, o G1. Assim, avaliámos de que forma a ativação seletiva do recetor pode contribuir para a reversão do stress oxidativo. Para isso, foram efetuados vários testes comportamentais para avaliar a função motora, como o Grip Test, o Rotarod e o Open Field Test, e foram medidos os níveis de mRNA de enzimas antioxidantes, por PCR em tempo real (RT-PCR). A partir dos testes comportamentais, foi possível concluir que a injeção da toxina não afetou o comportamento motor uma vez que os resultados obtidos no Rotarod, e distância total percorrida obtida no Open Field Test não mostraram diferenças significativas. Por outro lado, foi possível observar que a injeção com 6-OHDA aumentou os parâmetros relacionados com o comportamento ansioso. Desta forma, é possível concluir que a toxina não exerceu efeito ao nível do comportamento motor, porém, induziu alterações a nível não-motor. Relativamente à expressão das enzimas antioxidantes, observou-se um aumento, ainda que sem significância estatística, dos níveis de mRNA da Gpx4 e do Nrf2 em animais injetados com 6-OHDA. Este aumento, pode querer evidenciar um mecanismo de proteção desencadeado por estas enzimas para lidar com o stress oxidativo. No entanto, mais estudos seriam necessários para conseguir comprovar esta hipótese. Os nossos resultados evidenciaram efeitos exercidos pelo G1, quando entregue pelos dois tipos de administração. No entanto, não foi possível concluir se os dois tipos de entrega do G1 têm um efeito antioxidante na presença de um insulto dopaminérgico. Neste sentido, mais estudos seriam necessários para perceber se a ativação do GPER é capaz de modular o stress oxidativo e, se este efeito está relacionado com os seus efeitos neuroprotetores atualmente reconhecidos. | por |
| dc.identifier.tid | 202558126 | |
| dc.identifier.uri | http://hdl.handle.net/10400.6/10803 | |
| dc.language.iso | eng | por |
| dc.subject | 17ß-Estradiol | por |
| dc.subject | Doença de Parkinson | por |
| dc.subject | Enzimas Antioxidantes | por |
| dc.subject | Recetor de Estrogénios Acoplado à Proteína G | por |
| dc.subject | Stress Oxidativo | por |
| dc.title | Evaluation of the antioxidant action of the G protein-coupled estrogen receptor | por |
| dc.title.alternative | Contribution to the neuroprotective actions of the receptor | por |
| dc.type | master thesis | |
| dspace.entity.type | Publication | |
| rcaap.embargofct | Contém dados temporariamente confidenciais | por |
| rcaap.rights | openAccess | pt_PT |
| rcaap.type | masterThesis | por |
| thesis.degree.name | 2º Ciclo em Bioquímica | por |
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