Browsing by Author "Pinto, Isa Eunice Costa Figueiredo Paula"
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- Determinação de pesticidas organofosforados em amostras de urina com recurso a “dried urine spots"Publication . Pinto, Isa Eunice Costa Figueiredo Paula; Alba, Maria Eugénia Gallardo; Soares, Sofia Pires SeixoA presente dissertação encontra-se dividida em dois capítulos. O primeiro capítulo é referente à vertente de investigação e o segundo capítulo à experiência profissionalizante na vertente de Farmácia Comunitária. No primeiro capítulo é abordada a temática dos pesticidas e o desenvolvimento de um método para a sua identificação em amostras de urina. Os pesticidas são compostos químicos amplamente utilizados a nível mundial, podendo destacar-se a sua utilização em zonas rurais para controlar e proteger as plantações agrícolas das pragas de insetos. Os pesticidas organofosforados são um grupo particular dessas substâncias utilizadas principalmente como inseticidas. Esta família de compostos atua através da inibição da acetilcolinesterase, e a sua inativação prolonga a ação de estimulação dos recetores muscarínicos e nicotínicos nos vários sistemas e órgãos, resultando numa hiperatividade colinérgica. A acetilcolinesterase é comum em insetos e humanos, pelo que a eficácia destes agentes sobre os insetos é elevada, e uma vez que este neurotransmissor também se encontra presente nos humanos, os pesticidas organofosforados representam também um risco de intoxicação para os mesmos. A toxicidade destes agentes é elevada, sendo as intoxicações agudas o tipo de intoxicação mais frequente. O aparecimento da sintomatologia pode iniciar-se 5 minutos até algumas horas após a exposição, dependendo do grau de exposição, das propriedades físico-químicas do agente e dos excipientes da formulação comercial, bem como da atividade das acetilcolinesterases. Estes casos de intoxicação ocorrem especialmente em situações de suicídio ou em contactos acidentais, e na maioria das vezes podem levar à morte dos indivíduos principalmente por paragem respiratória. Na maioria das situações, os indivíduos só são socorridos nas unidades hospitalares quando todo o tóxico já se encontra totalmente distribuído ou na fase de excreção. Por estes motivos, é de grande interesse o desenvolvimento de métodos que permitam a rápida deteção deste tipo de compostos em amostras biológicas. Os pesticidas organofosforados selecionados para a realização deste estudo foram o diazinão, clorpirifos, clorfenvinfos, paratião-etil e quinalfos. Desta forma, para a otimização da técnica de extração foi feito um estudo univariado e foi utilizada uma ferramenta estatística para um estudo multivariado, de forma a avaliar os fatores de extração intervenientes. Assim, as condições finais otimizadas foram: solvente utilizado (metanol), volume de solvente (3 mL), tempo de secagem (12h) e tempo de extração (25 min). A elevada quantidade de interferentes biológicos existentes na matriz torna a preparação das amostras um passo fundamental no processo analítico. Desta forma, procedeu-se à avaliação da sua seletividade, no qual, não foram observadas interferências dos constituintes da matriz que coeluem com os compostos em estudo e/ou padrão interno. As recuperações variaram entre 0.22% e 32%. O método mostrou ser aplicável à análise de amostras reais, sendo então uma ferramenta vantajosa no âmbito de análises de toxicologia clínica. Como parte do estágio profissionalizante em Farmácia Comunitária tive a oportunidade de o realizar na Farmácia Matias Pereira de 1 de Fevereiro de 2021 a 11 de Junho de 2021, de forma a melhor compreender o trabalho do farmacêutico comunitário. Neste capítulo é descrito o funcionamento geral da farmácia, a apresentação da farmácia, a organização espacial e recursos humanos. Além disso, são também detalhadas todas as atividades desempenhadas pelo farmacêutico no contexto de farmácia comunitária, desde a gestão de produtos, receção de encomendas, dispensa de medicação e o próprio aconselhamento farmacêutico para uma utilização adequada do medicamento.
- The role of cGMP on adenosine A1 receptor-mediated inhibition of synaptic transmission at the hippocampusPublication . Pinto, Isa Eunice Costa Figueiredo Paula; Cascalheira, José Francisco da Silva; Sebastião, AnaThe adenosine A1 receptor is highly expressed in hippocampus where it inhibits synaptic transmission and has neuroprotective activity. Similar actions are obtained by increasing the concentration of the second messenger cGMP and recently it was found that activation of adenosine A1 receptor increased cGMP levels in the nervous system, but the role of cGMP on adenosine A1 receptor mediated inhibition of synaptic transmission remains to be established. This work addressed if the adenosine A1 receptor inhibitory effect on neurotransmission is dependent on the cGMP pathway. To answer this question investigated in what extent increasing the levels of cGMP (with a phosphodiesterases inhibitor and a cGMP analog), or blocking the cGMP pathway (using nitric oxide synthase, protein kinase G and soluble guanylyl cyclase inhibitors) modify the inhibitory effect of an A1 receptor agonist on synaptic transmission. The hippocampal slice was used as an experimental model and neurotransmission evaluated through extracelular electrophysiological recording technique, specifically by measuring the slope of field excitatory postsynaptic potentials (fEPSPs) evoked by electrical stimulation. N6-cyclopentyladenosine (CPA, 15nM), a selective adenosine A1 receptor agonist, reversibly decreased the fEPSPs by 48% ± 2.1% (n=5; P<0.05). Incubation of the slices with a phosphodiesterase inhibitor Bay 60-7550 (100 nM), in order to prevent cGMP degradation, did not modify the CPA (15 nM) inhibitory effect on fEPSPs (50%±2.8%, n=5; P>0.05 when compared with CPA alone). The presence of a membrane-permeable analog of cGMP, 8-pCPTP-cGMP (10 µM), also did not significantly affect (P>0.05) the CPA (15nM) inhibitory effect on fEPSPs (59.0%±4.5% in the absence and 50%±8.6% in the presence of 8-pCTP-cGMP, n=4). On the other hand, inhibition of nitric oxide synthase (NOS) by L-NAME (200 µM) decreased (P<0.05) the CPA (15nM) inhibitory effect on fEPSPs (54%±5.3% in the absence and 23%±5.7% in the presence of L-NAME, n=5, female rats). In male rats, the presence of a Protein Kinase G (PKG) inhibitor (KT5823, 1nM) decreased the inhibitory effect of CPA (15nM) on fEPSPs by 45.0%±8.9% (n=4, P<0.05 compared with zero); similar results were obtained in females. Finally the effect of an inhibitor of soluble guanylyl cyclase (sGC), ODQ (10 µM), on the CPA (15 nM) inhibitory action on fEPSPs was investigated. In males ODQ decreased (P<0.05) the CPA inhibitory effect (50%±4.3% in the absence and 39%±6.0% in the presence of ODQ, n=4), but only when adenosine deaminase (1 U/ml) was present; similar results were found in females. In conclusion, the results strongly suggest that inhibitory action of adenosine A1 receptors on glutamatergic neurotransmission at the hippocampus is, at least partially, mediated by activation of the NOS/sGC/cGMP/PKG pathway.