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As células microgliais são os principais intervenientes na resposta inflamatória inata no cérebro adulto. Num contexto de lesão cerebral, a resposta das células da microglia envolve mecanismos de fagocitose de neurónios mortos ou danificados, libertação de fatores tróficos e/ou inflamatórios, e a produção de espécies reativas de oxigénio (ROS).
A histamina é uma amina encontrada em grandes quantidades em mastócitos, neurónios histaminérgicos, e leucócitos. No Sistema Nervoso Central (SNC), a histamina também é libertada por células da microglia e exerce as suas funções através da ativação de quatro subtipos de recetores acoplados a proteínas G: H1, H2, H3 e H4. Previamente, mostramos que a histamina modula a motilidade microglial e a libertação de citocinas. Os principais objetivos deste trabalho foram: i) avaliar o papel da histamina na atividade fagocítica microglial e na produção de ROS; e ii) explorar as consequências da inflamação microglial induzida pela histamina na sobrevivência neuronal dopaminérgica.
Inicialmente, verificamos que a histamina, através da ativação do recetor H1R, induziu um aumento de fagocitose na linha celular N9 de microglia, quando comparada com a condição controlo. Este efeito foi acompanhado por um rearranjo do citoesqueleto microglial monitorizado através da imunomarcação para a faloidina e a tubulina acetilada. A histamina também induziu um aumento da produção de ROS através da ativação dos recetores H1R e do H4R. A apocinina, um inibidor do NADPH oxidase, foi capaz de inibir totalmente a fagocitose e a produção de ROS mediada pela histamina. A incubação com lipopolissacarídeo (LPS), utilizado como controlo positivo, também induziu um aumento significativo de fagocitose e produção de ROS, quando comparado com culturas controlo.
Por outro lado, a injeção estereotáxica de histamina ou LPS na substancia nigra de murganhos adultos da estirpe C57BL/6 durante 7 dias, induziu um aumento da reatividade glial e uma diminuição robusta na sobrevivência neuronal dopaminérgica. Tanto a apocinina como a anexina V (usada como inibidor de fagocitose induzida pela fosfatidilserina) inibiram completamente a toxicidade dos neurónios dopaminérgicos induzida pela histamina.
Surpreendentemente, valores semelhantes à condição controlo, nos parâmetros avaliados invitro (fagocitose e produção de ROS) e in vivo (sobrevivência neuronal dopaminérgica), foram encontrados quando se procedeu à co-administração de histamina e LPS.
Em geral, os nossos resultados sugerem que a histamina induz a reatividade da microglia e que este efeito pode modular a sobrevivência neuronal dopaminérgica. Histamina per se atua principalmente como um agente pro-inflamatório induzindo neurotoxicidade. Contudo, na presença de LPS, a histamina pode exercer atividade anti-inflamatória e neuroprotetora.
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Keywords
Sistema nervoso central Células da microglia Canais de cálcio Fagocitose Histamina Lipopolysaccharide (LPS)