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- Recuperação de microRNA através de Partículas MagnéticasPublication . Pinto, Joana Margarida Teixeira; Sousa, Fani Pereira de; Roque, CecíliaO conceito de utilizar moléculas de RNA como agentes terapêuticos é relativamente novo, e a sua concretização requer a preparação de RNA em grande quantidade, mantendo a sua integridade, pureza e atividade biológica. Assim, torna-se cada vez mais imperativo o desenvolvimento de novas metodologias de recuperação do RNA cada vez mais eficientes, robustas e seletivas. Independentemente da origem do RNA, as fases de recuperação/isolamento e purificação desta biomolécula são de particular relevância e são cruciais para a obtenção de RNA biologicamente ativo e quimicamente estável. No presente trabalho, a bactéria Rhodovulum sulfidophilum DSM 1374 foi utilizada como hospedeiro recombinante para a produção de RNA, uma vez que apresenta várias vantagens, como a secreção diferencial de ácidos nucleicos durante o crescimento celular e a ausência de RNases. Para a recuperação do RNA presente no meio de cultura de R. sulfidophilum, mantendo a sua estabilidade, foi proposta uma estratégia baseada na utilização de nanopartículas magnéticas (MNP). Esta estratégia apresenta-se como mais vantajosa em relação a outras metodologias aplicadas, uma vez que com a secreção do RNA, o nível de contaminantes é inferior ao encontrado num extrato intracelular, o que facilita o processo de uma forma global. Por outro lado, a recuperação dos RNAs a partir do meio de fermentação poderá ser uma abordagem promissora, já que é evitada a utilização de sais e solventes orgânicos tipicamente necessários em processos convencionais de recuperação de RNA. No geral, é proposto o desenvolvimento de um método económico e rápido para a recuperação de moléculas de RNA funcionais com qualidade e atividade biológica. Neste âmbito, as MNPs foram usadas como meio de captura do RNA pois são fáceis de utilizar e permitem uma operação numa vasta gama de condições. As interações entre o RNA e as MNPs revestidas com o polímero dextrano foram as primeiras a serem investigadas, de maneira a saber em que condições as interações inespecíficas eram minimizadas, de forma a explorar a especificidade da interação do RNA com os ligandos usados na funcionalização das partículas. Verificou-se que com 1,5 M de sulfato de amónio a pHh 7,5 a percentagem de ligação era a mais baixa. Após este estudo inicial, as MNP foram funcionalizadas com diferentes aminoácidos ou derivados (arginina, agmatina, histidina, metionina e tirosina). Os resultados obtidos permitiram concluir que, o método utilizado para a funcionalização das MNP com os aminoácidos, deve ser otimizado, de modo a aumentar a densidade de ligando e, assim, aumentar a ligação do RNA às MNP. Como a estratégia de ligação com 1,5 M de sulfato de amónio em 10 mM de tampão Tris-HCl, a pH 7,5 e a variação da concentração das MNPs de 10 mg/mL para 30 mg/mL, não se traduziu num aumento significativo da ligação do RNA às MNP a estratégia foi alterada, sendo explorada a possibilidade de utilizar as MNPs revestidas para captura de RNA total ao invés de explorar a seletividade. Assim, as MNP revestidas com dextrano foram testadas relativamente à captura de RNA a partir de meios de fermentação de R. sulfidophilum suplementado com RNA, de maneira a avaliar o comportamento das MNP com os componentes do meio. Como a percentagem de ligação foi relativamente baixa e, sabendo que durante o processo de fermentação há consumo de nutrientes e libertação de metabolitos para o meio, a estratégia seguinte consistiu na avaliação do comportamento de ligação em amostras reais de fermentação. A primeira abordagem conduziu a uma captura de 10,6% de RNA, mas após otimização da força iónica do meio, a captura foi significativamente aumentada. Assim, ajustando a força iónica do meio para 1,5 M de sal foi recuperado 12,3% do RNA e um aumento da força iónica para 3 M conduziu a uma recuperação de 30,2%. Estes resultados são muito relevantes uma vez que, a suplementação do meio é um recurso viável tornando possível a captura de uma biomolécula com um crescente interesse por parte da indústria. De uma forma geral, este estudo preliminar permitiu concluir que com altas concentrações molares as percentagens de ligação são mais elevadas e que no futuro deve ser testado um novo método de funcionalização das MNP de maneira a aumentar a ligação e posteriormente, uma possível seletividade das MNPs para RNAs específicos.
- Percurso de um Farmacêutico MilitarPublication . Vicente, Armando Cerezo Granadeiro; Duarte, Ana Paula CoelhoEm qualquer percurso as características pessoais determinam a direção do mesmo; aceitar desafios, a participação associativa e a formação continua foram sem dúvida as características que marcaram este trajeto. Este trabalho pretende mostrar o percurso do Farmacêutico Militar Armando Cerezo Granadeiro Vicente que compreende duas componentes paralelas mas indissociáveis: A carreira de Farmacêutico Militar e a Carreira de Farmacêutico Civil.
- Influência do ângulo de injeção nas emissões de poluentes e temperatura de combustãoPublication . Moreira, Pedro Carvalho; Brojo, Francisco Miguel Ribeiro ProençaDevido ao aumento do tráfego aéreo e às crescentes preocupações com o meio ambiente, é importante estudar formas de reduzir as emissões de poluentes. É também importante estudar medidas para proteger os componentes de uma aeronave das elevadas temperaturas geradas na câmara de combustão. No presente trabalho é realizada uma simulação CFD, cujo componente de estudo é uma câmara de combustão de uma turbina a gás CFM56-3. É pretendido avaliar as emissões de poluentes e a variação das temperaturas através da variação dos ângulos de injeção de combustível. Sendo este um estudo de continuidade, foi usado o CAD e alguns dos dados elaborados pelo Engenheiro Jonas Oliveira procedendo-se às alterações necessárias para melhoramento dos resultados. Para a geração da malha foi usado o software HELIX-OS e para o cálculo numérico o software comercial Fluent 16.2. Será observada a influência dos ângulos de injeção tanto para controlo das emissões de poluentes, bem como a variação das temperaturas para proteção dos materiais constituintes de uma turbina a gás. São feitas várias simulações CFD para uma variedade de ângulos de injeção considerados aptos para um bom funcionamento pela manutenção da TAP, e outros ângulos considerados inaptos para funcionamento do combustor. Foi concluído que dentro da gama de ângulos estudados, que o angulo de 58º é o que apresenta melhores resultados, temperaturas mais baixas e menores emissões de poluentes.
- As emoções positivas e a temporalidade humana: um estudo exploratório com adultosPublication . Pereira, Andreia Filipa Roque; Ramos, Ludovina Maria de AlmeidaAs emoções positivas, as motivações e a temporalidade são conceitos importantes quando nos referimos ao bem-estar ou felicidade do indivíduo, tratando-se de construtos que, pela sua complexidade e multidimensionalidade, continuam a necessitar de ser explorados para que aumente a compreensão sobre o desenvolvimento ótimal do ser humano. Assim e visto que a idade adulta será a fase da vida em que os indivíduos passam a maioria da sua existência, a presente investigação tem por objetivo descrever a população adulta no que diz respeito ao conteúdo e distribuição temporal das motivações, à vivência de emoções positivas e ao tipo de orientação temporal, avaliar as diferenças existentes na vivência de emoções positivas nas diferentes idades, estilos de identidade e situações laborais e analisar as relações entre a vivência de emoções positivas e a tipologia de orientação temporal. Para tal foram utilizados o Método de Indução Motivacional (MIM) (Nuttin & Lens, 1985; versão portuguesa de Paixão, 1996), o Inventário da Perspetiva Temporal de Zimbardo (IPTZ) (Zimbardo & Boyd, 1999; versão portuguesa de Ortun~o & Gamboa, 2009) e a Escala de Positividade (EP) (Fredrickson, 2009, 3013; versão portuguesa de Batista, 2012 e Luís, 2015). Em termos gerais, os resultados apurados indicaram uma elevada vivência de emoções positivas nos participantes que constituem a nossa amostra, obtendo-se também resultados semelhantes relativamente ao MIM e ao IPTZ em termos da orientação temporal futura dos participantes e de uma posição balanceada no tempo. Ainda no que diz respeito aos principais resultados, verificaram-se diferenças estatisticamente significativas nos níveis de positividade face aos estatutos de identidade, diferenças essas não suportadas em função da idade e da situação laboral. Por último, salientam-se as associações positivas e negativas encontradas, e significativas do ponto de vista estatístico, entre as emoções positivas e as dimensões temporais.
- Função Visual e Novas TecnologiasPublication . Festas, Sara Patrícia Carrilho; Nunes, Amélia Maria Monteiro FernandesSeja em momentos de estudo como na ocupação de tempos livres, é notório o uso das novas tecnologias. Verifica-se um contacto com estes dispositivos, cada vez mais cedo. Com o uso crescente de dispositivos digitais, cada vez mais os usuários trabalham em ambientes visuais exigentes e desafiadores. Comprova-se uma alteração de estilos de vida, com a aquisição de novos hábitos e comportamentos visuais e posturais, que acarretam algumas consequências na saúde visual. O objetivo deste trabalho é relacionar sinais e sintomas visuais com os hábitos adotados durante o uso de tecnologias digitais, numa população de adolescentes e jovens adultos. Foram realizados rastreios visuais em duas populações distintas: adolescentes do Ensino Básico e jovens adultos do Ensino Universitário. A amostra total é constituída por 285 estudantes com uma média de idades de 18,67±5,54 anos. A população é constituída por 66,67% de estudantes do Ensino Universitário e 33,33% de estudantes do Ensino Básico; 59,6% do sexo feminino e 40,4% do sexo masculino. Estudaram-se sintomas visuais (dores de cabeça, dor nos olhos, ardor nos olhos, olhos vermelhos, lacrimejo excessivo, comichão nos olhos, pálpebras pesadas, visão desfocada, visão dupla, areia nos olhos e intolerância à luz), hábitos adotados (horas diárias passadas a utilizar dispositivos digitais, distância de trabalho, iluminação adequada, pausas periódicas, olhar para objetos distantes durante essas pausas, utilização do computador numa secretária, utilizar dispositivos digitais antes de dormir) e sinais optométricos para inferir sobre qualidade da acuidade visual, visão binocular e acomodação. Com os dados recolhidos, foram realizados testes de correlação e testes de hipóteses, através do programa SPSS. Os resultados demonstraram que 86% da população estudada sente, pelo menos, um sintoma dos questionados; os sintomas tendem a ser mais notórios à medida que os estudantes passam mais horas consecutivas com dispositivos digitais; jovens adultos apresentaram ser mais sintomáticos que adolescentes e tendem a adotar piores hábitos visuo-posturais; tanto os sintomas como os hábitos podem variar significativamente segundo o género; usar dispositivos digitais antes de dormir mostrou ter correlação positiva com a dificuldade em adormecer; alunos com problemas refrativos por compensar mostraram ser aqueles que adotam piores hábitos e que têm mais sintomas.
- Resiliência multiculturalPublication . Xavier, Inês Nascimento Lopes Bilhota; Virtudes, Ana Lídia Moreira Machado Santos das; Castro, Ana Rita Martins Ochoa deNo âmbito da mais recente evolução urbana e sociológica, a prevenção da gentrificação é um fenómeno catalisador, sobre um processo que depende da sustentabilidade do desenvolvimento urbano-económico e político, como se verifica, quer em cidades dos Estados Unidos da América, nomeadamente em São Francisco e Chicago, quer na União Europeia como por exemplo em Berlim, Paris ou Istambul. Por gentrificação entende-se o processo de valorização de um determinado bairro de uma cidade, deslocando os seus moradores para outros sítios, por deixarem de ter poder económico em acompanhar esta dinâmica, sem capacidade para aí continuar a residir. O aumento de fenómenos como a segregação sócio urbanística, acompanham a fragmentação da sociedade neolibral atual, produzindo cidades como lugares de inovação, mas paradoxalmente, como lugares de tensão e de confronto cultural. O conceito social está associado a várias vertentes da cidade que estão atualmente no topo da agenda à escala global. Verifica-se, pois, uma disputa mediática em torno do termo "social" que poderá consequentemente esvaziar-se de sentido, tal como aconteceu com o termo "sustentabilidade", ainda que ambos continuem a dar visibilidade a caminhos alternativos, quer na arquitetura, quer à escala da cidade. Consequentemente, a arquitetura ligada a estes conceitos, poderá ser descrita como tendo dimensões temporais variáveis. Por outro lado, a crescente proliferação cultural de projetos de arquitetura temporários, tem vindo a redefinir as expectativas contemporâneas, em que o Tempo persiste como uma definição da arquitetura, isto é, a forma e o significado da impermanência ou da permanência. Para colmatar esta lacuna e face ao exposto, visando a definição de gentrificação (como processo de valorização de um determinado bairro), esta dissertação tem como objetivo a elaboração de uma proposta arquitetónica e urbanística de restruturação para um vazio urbano, num quarteirão, no bairro de Kreuzberg, localizado no centro da cidade de Berlim. É baseada num concurso de arquitetura promovido pela “ARCHmedium”, para tentar relacionar com a impermanência no desenvolvimento do quarteirão. Neste contexto foi necessário redefinir os modos coletivos e temporários enquanto um complexo agrupado que integra os edifícios e o espaço envolvente. Historicamente, a área do caso de estudo constituiu um bairro cujo extrato social correspondia a imigrantes pobres. Contudo, é atualmente por excelência um local interessante de foco artístico e boémio, considerado parte integrante de um dos principais enclaves do poder e da cultura na Europa, na maior cidade da Alemanha. Este bairro é um dos principais focos artísticos e exemplo marcante da resiliência multicultural da cidade. Entre outros aspetos, verificou-se a necessidade de implementar uma residência de estudantes e unidades de habitação complementadas com espaços coletivos, unidos aos elementos naturais existentes, para dar destaque ao rio Spree.
- Literacias: Uma AbordagemPublication . Saraiva, Rui Jorge Martins da Fonseca; Pereira, Reina Marisol TrocaEste breve estudo é uma pequena incursão sobre o tema da literacia. A importância da leitura é sustentada em estudos, inumeráveis estudos, que apontam indelevelmente para a criação mental de outras experiências mais profundas em termos intelectuais que depois se manifestam na resolução de problemas práticos do dia-a-dia, porque há mais vocabulário, há mais semântica e também mais sintática. As inferências meta textuais são importantes para substanciar o espírito crítico. Bem assim como a expressão artística que é relegada para terceiro plano. Uma pessoa bem integrada na sociedade deve conter conceitos estruturantes sobre arte e deve saber apreciar as várias formas de expressão artística. Este pequeno trabalho pretende ser uma apologia da leitura de uma forma em que segmentações da problemática são referenciadas e comentadas. É uma abordagem de alguns pontos sensíveis nesta matéria, como sejam os fatores que implicam a leitura em termos de procedimento, a situação da Literatura como género e como forma de repercutir a realidade, as dificuldades de articular uma linguagem despida do cânone ou o ensino de Português nas nossas escolas, bem assim como o lugar das novas tecnologias em ambiente escolar e social. Refere-se ainda algumas formas de literacia e exemplos que demonstram que há um longo caminho a percorrer em relação a esta temática. As áreas do conhecimento são imensas e influenciam-se mutuamente, mormente nesta área da leitura, com a Psicolinguística e as Teorias do Processamento da informação, a cruzarem-se com a Neurobiologia, a Semiótica e outras. A leitura tornou-se um hábito silencioso, difuso e muito especializado. Os mecanismos que influenciam a sua realização encontram-se na memória, na perceção e nas capacidades cognitivas, juntamente com os sentimentos e emoções que vão do geral para o particular e vice-versa, quer se trate de uma pequena parte do texto que encerra algo com sentido, ou a construção estrutural dos diversos compósitos de que o texto é portador. Para isso são necessários estudos para aferir das condições internas ao sujeito leitor, bem como assim as condições externas, como o ambiente social, cultural, biológico etc. Mas é no sentido difuso da busca que o leitor entrevê ou procura, que julgo ser essencial a prossecução de estudos.
- Património ArquitetónicoPublication . Matos, Rúben Miguel Inácio de; Martins, Ana Maria Tavares Ferreira; Campos, Inês Daniel deO tema da reabilitação é atualmente um tema de destaque no que diz respeito à área cientifica da arquitetura. Contudo, continua a ser necessário o estudo sobre a coesão entre o objeto de estudo, o que a ele se associa e do que dele se desenvolve. Deste modo, debruçando esta dissertação sobre o Teixoso, Freguesia do Concelho da Covilhã, este tema vem colmatar a falta de visibilidade e a ausência de identidade do património deste local. Este, que por muitos anos tem sido esquecido e colocado em risco de desaparecimento. A criação de uma rota cultural, quer por via da reabilitação, quer por via da revitalização, terá como fim o aproveitamento de espaços que outrora marcaram esta vila, atribuindo-lhes novos usos através de equipamentos e serviços de caráter cultural, turístico e social. Casas senhoriais, fontes, ruas, são alguns elementos que compõem o elenco de edifícios e espaços que demarcam esta proposta. Esta rota, respeitando a malha existente, será premissa para a proposta de reabilitação da Quinta de São João, local onde termina a rota proposta, com o objetivo de afirmação identitária da freguesia do Teixoso, Covilhã. Esta será uma forma de apontar soluções para as várias lacunas existentes, tais como, o turismo e cultura em meio rural, a revitalização do casco histórico, criação de atividades lúdicas intergeracionais e a vontade de expor, valorizar e dar a conhecer as origens históricas desta freguesia.
- Enonas esteroides como potenciais agentes antitumoraisPublication . Lopes, Filipe José Miguel; Silvestre, Samuel MartinsA oxidação alílica é um processo sintético de grande importância industrial devido à sua ampla variedade de aplicações na síntese de produtos químicos e farmacêuticos. Alguns exemplos relevantes deste tipo de reação incluem a oxidação de ?5-esteroides aos seus derivados ?5-7-oxoesteroides correspondentes. Os métodos clássicos para realização destas reações envolvem o uso de um excesso de reagentes indesejáveis de crómio, manganésio ou selénio. Recentemente o uso de hidroperóxidos, em combinação com diferentes tipos de catalisadores metálicos em formas homogéneas e heterogéneas, tem despertado interesse. Posteriormente, outros processos diferentes foram relatados e, entre estes, a combinação de clorito de sódio, como oxidante, e N-hidroxiftalimida, como catalisador, revelou ser um procedimento eficiente e mais aceitável em termos ambientais para esta transformação. Para acelerar esta reação de oxidação, o potencial de vários catalisadores metálicos foi explorado. Na presente dissertação descrevem-se oxidações alílicas de ?5-esteroides nestas condições, mas explorando o uso de compostos de vanádio, como o VO(acac)2, bem como de outros catalisadores metálicos. Curiosamente, o consumo total de substrato foi observado após 15 minutos de reação; no entanto, um produto secundário também foi detetado, além dos ?5-7-oxoesteroides esperadas. Na tentativa de ultrapassar esta observação, diferentes condições de oxidação foram também investigadas com o objetivo de melhorar este processo oxidativo. Para além disso, foi também estudado o efeito antiproliferativo de alguns ?5-esteroides e os seus correspondentes ?5-7-oxoesteroides, em linhas celulares PC3 e N27. Este estudo foi realizado com o intuito de avaliar o potencial destes compostos como agentes anticancerígenos, tendo sido calculado o IC50 de cada um destes compostos. Interessantemente, verificou-se que os compostos 7-oxidados da diosgenina e da pregnenolona se apresentaram mais tóxicos que os percursores não oxidados para a linha celular PC3.
- Susceptibilidade genética à diabetes mellitus tipo 1: variantes genómicas nas vias de metabolismo da vitamina DPublication . Almeida, Joana Trigo Rodrigues; Lemos, Manuel Carlos LoureiroA diabetes mellitus tipo 1 (DM1) é uma doença autoimune que resulta da destruição selectiva das células produtoras de insulina, as células ß pancreáticas, em indivíduos geneticamente susceptíveis. A vitamina D (vit D) é a principal responsável pela manutenção dos níveis de cálcio e fosfato e pelo metabolismo ósseo. No entanto, a vit D está também envolvida na modulação da resposta imunitária e tem sido consistentemente associada a doenças autoimunes, como a DM1. Doentes com DM1 apresentam uma maior prevalência de défice de vit D e a suplementação com vit D parece diminuir o risco para DM1, sugerindo uma associação entre a DM1 e a vit D. Os níveis de vit D dependem parcialmente da dieta e da exposição solar mas também de factores genéticos. Os polimorfismos de nucleótido único (SNP’s) localizados nas proximidades ou nos genes que codificam enzimas cruciais para a síntese (DHCR7-rs12785878), metabolismo (CYP2R1-rs2060793) e catabolismo (CYP24A1-rs6012897) da vit D, têm mostrado associação com os níveis de vit D e com o risco para a DM1. O objectivo deste estudo foi determinar a associação entre estes 3 SNP’s presentes na via de metabolismo da vit D e a susceptibilidade genética para a DM1 na população portuguesa. Foi desenhado um estudo caso-controlo de modo a analisar a prevalência dos SNP’s em 320 doentes DM1 e 486 controlos saudáveis através das técnicas de PCR e de genotipagem por enzimas de restrição. As frequências alélicas e genotípicas foram comparadas entre doentes e controlos. Paralelamente avaliámos a associação destes polimorfismos com vários parâmetros clínicos da doença. Os resultados sugerem que o polimorfismo CYP2R1-rs2060793 está associado com um aumento do risco de incidência da DM1. Observámos também uma possível associação entre este polimorfismo e o desenvolvimento da retinopatia diabética. Quanto ao polimorfismo DHCR7-rs12785878 verificou-se uma possível associação com a idade de diagnóstico e o genótipo heterozigótico parece estar associado com o desenvolvimento de anticorpos anti-GAD65. Detectámos ainda uma tendência de associação entre os SNP’s DHCR7-rs12785878 e CYP24A1-rs6013897 e o género do doente. As descobertas feitas necessitam de ser confirmadas e reavaliadas em novos estudos com populações mais numerosas, no entanto, podem contribuir para uma melhor compreensão da patogénese da DM1 e o papel da vit D na autoimunidade e na susceptibilidade genética para a DM1.