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- A aprendizagem através da perspectiva filosófica dos afetos e dos erros: Um caminhar alagmático entre a matemática e a língua portuguesaPublication . Peel, Misleine Andrade Ferreira; Simões, Maria de Fátima de Jesus; Beites, Patrícia DamasNossa tese consiste em alargar o conceito de aprendizagem por afetos e por erros, em matemática e em língua portuguesa; contribuindo, assim, para o campo teórico interdisciplinar entre a educação matemática e a educação linguística, e promovendo, ainda, uma experimentação profícua do conhecimento, especialmente através da filosofia deleuziana. A aprendizagem é um processo complexo e múltiplo; muitos dos que passam pelo processo de escolarização não conseguem se manifestar de forma crítica, autônoma e livre nas experimentações cotidianas dos aspectos sociais, políticos e econômicos de suas vidas; percebemos que, em muitas ocasiões, esses problemas advêm da ausência de afetos positivos no ambiente educacional, e, a partir disso, desenvolvemos as seguintes questões de investigação: Como o erro afeta os sujeitos em processo de aprendizagem no ambiente escolar e em suas futuras escolhas profissionais? Como a relação afetiva com a matemática e com a língua portuguesa pode reterritorializar a aprendizagem, transformando-a em uma potência positiva? No processo de aprendizagem, existe diferença entre os gêneros masculino e feminino nas relações afetivas com a matemática e com a língua portuguesa? Para subsidiar nossas respostas, promovemos um agenciamento entre autores como Deleuze, Guattari, Spinoza, Freire, Cury e Sen; dentre outros que constituíram nossos agenciamentos teóricos rizomáticos sobre a aprendizagem. Para endossar esta pesquisa, fizemos estudos de casos múltiplos, utilizando, como instrumentos para a triangulação dos dados, entrevistas semiestruturadas, questionário e análise documental. Foram entrevistados oito estudantes que cursam o ensino médio. Dentre eles, quatro estudantes com sucesso escolar nas disciplinas de matemática e língua portuguesa, e quatro com baixo rendimento acadêmico nessas disciplinas, todos de escolas públicas. Um total de 94 estudantes do ensino fundamental II e do ensino médio, de onze escolas, responderam ao questionário online, no ano letivo de 2021. E, por fim, fizemos uma análise dos documentos a partir do estudo e da reflexão sobre os dados do resultado de uma avaliação externa, PISA, de 2018; para verificar alguns aspectos que a teoria contempla e para possibilitar respostas aos nossos questionamentos investigativos. A maior parte dos estudantes que participaram deste estudo consideram que os erros trazem afetos negativos, afirmando, contudo, que continuam tentando resolver os problemas, não desistindo do processo; maioritariamente concordam, ainda, que o modo como se saem na escola influencia nas suas escolhas profissionais. Encontramos, ainda, uma grande importância dada ao professor no processo educacional. Concluímos, a partir dessa investigação, que é necessária uma metamorfose afetiva no processo de ensino e de aprendizagem, entendendo e valorizando o poder dos afetos, dos encontros e dos devires. Precisamos, dessa forma, de uma visão íntegra sobre os sujeitos, sobre o processo de ensino, sobre as experimentações da aprendizagem e sobre as variáveis que incidem nesse processo.
- Music Therapy and Autism Spectrum Disorder: Literature ReviewPublication . Silva, Carolina Isabel Caldeira da; Oliveira, Catarina Filipa Pereira; Santos, Vítor Hugo JesusAutism spectrum disorder is a complex neurobiological disorder that affects social interaction, communication, and behavior. While there is no cure, MT has emerged as one of the most effective ways to improve the quality of life for individuals with autism. Music can help with communication, emotional expression, and reducing anxiety, providing a structured and predictable environment. MT can be used as a tool for self-expression, learning new concepts, and improving motor control. However, more research is needed to develop disease-modifying therapies that target the core deficits of the disorder.
- Deteção molecular de clostridia, produtores de neurotoxinas botulínicas do tipo A, B, E e F por PCRPublication . Marques, Ana Filipa Tavares Freire; Carvalho, Josué Leandro de Oliveira e; Domingues, Fernanda da ConceiçãoO presente relatório de estágio está integrado no 2º ano do Mestrado em Biotecnologia, da Universidade da Beira Interior. Este decorreu durante oito meses no departamento de Biologia Molecular da empresa multinacional ALS Life Sciences Portugal, S.A., sediada em Tondela. O principal objetivo foi o desenvolvimento e validação de um método de deteção molecular de clostridia, produtores de neurotoxinas botulínicas do tipo A, B, E e F por PCR em tempo real. Clostridium botulinum é uma bactéria anaeróbia que produz neurotoxinas altamente potentes e endósporos resistentes, daí ser uma preocupação mundial a nível da segurança alimentar. Após a sua ingestão, a toxina liga-se aos terminais nervosos colinérgicos onde, devido à sua atividade como endopeptídase, cliva as proteínas responsáveis pela libertação de acetilcolina para a fenda sináptica. Devido a esta ação, a transmissão nervosa fica comprometida. Assim, é crucial haver um diagnóstico rápido com base em metodologias sensíveis e específicas da análise de DNA, para detetar esta bactéria em alimentos. Neste trabalho pretendeu-se, através da aplicação da técnica de PCR em tempo real, fazer a deteção molecular de clostridia produtores de neurotoxinas botulínicas tipo A, B, E e F. Este método apresenta uma evolução comparativamente à técnica de PCR convencional devido a ser mais rápido e sensível. Foram realizados testes para a determinação do limite de deteção, análise de especificidade e contaminação artificial de amostras reais. Para isso utilizaram-se 11 bactérias diferentes e 5 tipos de matrizes alimentares, sugeridas na norma ISO/TS 17919:2013. Os resultados demostraram especificidade de primers e sonda e um limite de deteção de 10 cópias/µL para a toxina A, B e F e um limite de 100 cópias/µL para a toxina E.
- Perceção da Qualidade do Ambiente Educativo no Mestrado Integrado em MedicinaPublication . Fazenda, Iara Alexandra Matos; Neto, Isabel Maria Fernandes; Gouveia, Ana Isabel Antunes Dias RodriguesO ambiente educativo é definido por tudo aquilo que se passa na sala de aula, na faculdade, na instituição, englobando assim características físicas, sociais, tecnológicas e psicológicas. Tanto os aspetos positivos como os aspetos negativos do ambiente educativo vão ter influência sobre como o aluno se sente na sua escola médica. Deste modo, a forma como o ambiente educativo é percecionado pelos alunos tem um impacto profundo neste e na sua formação, nomeadamente nos seus resultados académicos e profissionais, na sua motivação, no seu bem-estar e na sua qualidade de vida. Por estas razões, demonstrou-se relevante avaliar qual a perceção dos alunos de medicina da Faculdade de Ciências da Saúde quanto ao seu ambiente educativo. Com essa finalidade, aplicou-se um questionário aos alunos de medicina que tinham concluído o 3º ano curricular, ao longo de 7 anos letivos (2014/15 até 2020/21). Em geral, os resultados foram bastante positivos e demonstraram que os alunos de medicina da Universidade da Beira Interior têm uma perceção bastante boa do seu ambiente educativo. Porém, existem ainda áreas que requerem melhoria, tendose destacado sobretudo a área da investigação, na qual os alunos demonstraram sentir falta de oportunidades e de motivação. Através da avaliação da perceção dos alunos do seu ambiente educativo é possível identificar quais as áreas onde as medidas de melhoria a aplicar são mais urgentes e posteriormente, através da aplicação de questionários, avaliar se as medidas implementadas tiveram impacto na opinião dos alunos.
- Development of an Educational Game: Math-MastersPublication . Marques, João Abel Bento Tátá; Silva, Frutuoso Gomes Mendes daDevelopment of Math-Masters - educational/serious game for learning of the basic multiplication in mathematics. Beyond being educational, Math-Masers is a deckbuilding roguelike game in the third perspective, where the player runs through tracks of enemies and must defeat them, in a fantasy medieval world setting. The main inspiration for Math-Masters is Fun Math Facts: Games for Kids, developed by Speedmind llc, where the player must defend itself from incoming monsters heading their way through math. The programming of the game was done by me, according to the design proposed by my colleague João Ferreira who also provided the models of the objects, art and game content. The game engine Unity was used, with the integration of an online database from PlayFab. About the Methodology, this document consists in showing how the game mechanics were implemented and how it is organized. The game is available to be tested in Itch.io through the following link: https: //thejokelion.itch.io/math-masters
- Emulsified Pullulan Films Incorporating Geraniol: Production and CharacterizationPublication . Simões, Alexandra Cristina da Silva; Luís, Ângelo Filipe Santos; Domingues, Fernanda da Conceição; Ramos, Ana Maria MatosPetroleum-based plastics have been widely used as packaging materials because of their low-cost availability and good mechanical properties. However, the use of plastics has become restricted as they are highly resistant to biodegradation, causing environmental problems. For use as potential substitutes for conventional plastics, this work aims to produce and characterize emulsified pullulan films incorporating geraniol for application as food packaging material. Geraniol showed antimicrobial activity against Staphylococcus aureus ATCC 25923 (inhibition zone diameter = 15.44 ± 1.72 mm); Enterococcus faecalis ATCC 29212 (inhibition zone diameter = 11.37 ± 0.75 mm); Salmonella Typhimurium ATCC 13311 (inhibition zone diameter = 8. 61 ± 0.51 mm); Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 (inhibition zone diameter = 7.31 ± 0.61 mm); Escherichia coli ATCC 25922 (inhibition zone diameter = 11.48 ± 0.18 mm) and Listeria monocytogenes LMG 16779 (inhibition zone diameter = 25.62 ± 0.36 mm). When geraniol was incorporated into the films, they showed antimicrobial activity against Enterococcus faecalis ATCC 29212 (inhibition zone diameter = 15.19 ± 0.66 mm) and Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 (inhibition zone diameter = 10.99 ± 1.82 mm). Furthermore, scanning electron microscopy showed the reduction of Enterococcus faecalis ATCC 29212 biofilms when they were directly formed on the emulsified pullulan films incorporating geraniol. This study also revealed the anti-quorum sensing potential of geraniol (inhibition zone diameter = 9.12 ± 0.22 mm), where it could prevent communication between microbial cells. The produced films also demonstrated high transparency (>90%) and hydrophilic surfaces on both sides (water contact angle <90°). This research proved that bioactive pullulan films incorporating geraniol can be used as innovative food packaging materials. Expanding the production of these films should be the focus of future work.
- Evaluation of novel chemistries on porous supports for plasmid DNA polishing chromatographyPublication . Luís, Marco Ângelo; Rammo, Oliver; Sousa, Fani Pereira de; Tomaz, Cândida Ascensão TeixeiraDNA-based therapeutics are one of the main applications aiming to find a course of treatment for hereditary diseases as well as cancer. They provide additional benefits when compared to traditional therapeutics. Plasmid DNA (pDNA) is one of the most utilized species of DNA-based therapeutics due to its ability to induce significant expression of a trans-gene and a comparably easy manufacturing process, without any of the disadvantages viral vectors show. This form of DNA presents linear, open circle and supercoiled isoforms, while being possible to switch between them, based on the amount and location of nicks in the sequence. The supercoiled isoform is the most biologically significant one since it allows for higher efficiencies of trans-gene expression. In order to use pDNA for human treatment, it needs to be purified so that the final product consists of a homogeneous supercoiled pDNA pool. To obtain this, a chromatography process with a combination of several interactions presents the best course of action, which is demonstrated by multiple products currently on the market. Nevertheless, the existing supports that are focused on the chromatographic step specific for the isolation of the relevant pDNA isoform (polishing step) do not present the best performance characteristics, both in terms of the purity obtained and the yield. Therefore, the present work aims to develop a novel polishing chromatographic material to produce supercoiled pDNA with higher purity and recovery. To do this, firstly, static binding experiments were conducted to confirm the results previously obtained by another working collaboration. Then, the promising prototypes were subjected to dynamic binding conditions, with the objective of assessing their capabilities to isolate the supercoiled isoform. This was followed by the development of several new agmatine-based prototypes where elution buffer composition and pH were optimized to achieve the highest resolution and purity of supercoiled pDNA. Afterwards, a step-elution method and optimization were conducted with a 3rd generation agmatine prototype, since it presented the best results in terms of supercoiled purity. With the optimized method, a complex sample of RNA and pDNA was applied to the prototype to evaluate if it was capable of separating supercoiled pDNA from other isoforms and similar molecules. The results indicated that the agmatine prototype is efficient in the purification of supercoiled pDNA from complex samples, with a high degree of purification, and in accordance with the specifications of regulatory agencies.
- Mistura passiva de ar/combustivel Estudo CFD e em motor Honda GX25Publication . Duarte, António Maria Caldas Travassos de Oliveira; Brojo, Francisco Miguel Ribeiro ProençaÉ observável, no estado atua] da economia global, um declínio das condições ambientais. De facto, alguns países registaram temperaturas recorde durante () ano de 2022 devido a este declínio. [69]. É conhecimento comum que o rendimento dos motores de combustão a 4 tempos é baixo [40]. Estes motores são usados em várias aplicações, desde máquin!ll.S de cortar relva até aeronaves de várias toneladas. Assim, um pequeno aumento neste rendimento pode ter consequências gigantes no futuro. Esta dissertação tem como objetivo a melhoria do rendimento de um motor a 4 tempos. O sistema de admissão irá receber geradores de vórtices no seu túnel d.e venturi com o objetivo de melhorar a mistura entre os dois fluidos envolventes no processo. Inicialmente, toda a teoria envolvida neste t ipo de trabalho foi estudada. e revista. Em seguida., o sistema de admissão foi medido e foi feito um estudo CFD (cerca de 20 simulações no total) alterando a posiç,ão de vários geradores de vórtice e observando o seu impacto na distribuição do combustível imediatamente antes da admissão de ar do motor usando, um programa criado em Visual Basic Applications. Finalmente, após chegar a uma conclusão no estudo teórico CFD (dois geradores à entrada do d ifusor espaçados em 180 graus) é transportado o conhecimento obtido para uma componente mais práticH, observando o impacto que a alteração tem comparando com a peça original usando uma mesa de testes coustruida e adaptada ao motor em questão usando sensores lidos através de um microprocessador (arduíno). Conclui-se que a peça construida usando conhecimento de engenharia obterá os melhores resultados. A peça no qual foram colocados os geradores tem resultados intermédios. Finalmente a peça original tem os piores resultados.
- Investigating the role of obesogens affecting tumour microenvironment: the tributyltin-adipose tissue-prostate cancer cells triadPublication . Casanova, César David Rodrigues; Socorro, Silvia Cristina da Cruz Marques; Correia, Sara Carina de Lima; Feijó, Mariana PombalProstate cancer (PCa) is a leading cause of death worldwide and a major public health concern. Obesity, a well-established risk factor for PCa, has been shown an increased prevalence over the years. Focusing on the significant role of the tumour microenvironment in cancer physiopathology, recent studies have implicated the “obese” periprostatic adipose tissue (PPAT) in the onset and progression of PCa. In this condition, the PPAT secretion of adipokines, chemokines, and growth factors is affected, creating a pro-inflammatory environment, and providing alternative energy sources for tumour cells. Noteworthy, recent years have also shown that fat accumulation is more than a consequence of genetics, sedentarism or unhealthy eating behaviours, resulting from chronic exposure to endocrine-disrupting chemicals (EDCs), the so-called obesogens. The obesogen model tributyltin (TBT), a persistent aquatic contaminant once extensively used as a biocide in ship paints, induces adipocyte differentiation, lipid accumulation, and lipid droplet formation even with only a single day of exposure. The present dissertation hypothesizes that TBT can disrupt PPAT and its secretome, dysregulating the crosstalk with prostate cells and acting as a driving force in PCa. Conditioned media (CM) assays were performed by exposing neoplastic (PC3) and non-neoplastic (PNT1A) human prostate cells to the secretome of TBTtreated PPAT (PPAT-TBT-CM) and control (PPAT-CM) for 24 hours. Prostate cell viability, proliferation, apoptosis, and migration were analysed by MTT assay, Ki67 immunocytochemistry, caspase-3-like activity, and scratch assay, respectively. Moreover, to access metabolic changes, free fatty acids (FFAs), glucose consumption, and lactate production were evaluated by colorimetric assays. Thiobarbituric acid reactive substance (TBARS) assay and Griess assay were employed to access prostate cells’ lipid peroxidation levels and inflammatory response, respectively. Exposure to PPAT-TBT-CM resulted in increased viability, proliferation, and migration, accompanied by a reduction in the rate of apoptosis in both prostate cell lines. Considering the metabolic changes induced by PPAT-TBT-CM, PNT1A cells exhibited a significant increase in FFAs uptake and a decrease in glucose consumption, with no discernible differences found in lactate production. In contrast, in PC3 cells, PPATTBT-CM markedly increased FFAs and glucose uptake, and lactate production. Surprisingly, treatment with PPAT-TBT-CM decreased lipid peroxidation in both cell lines. Nitrite production upon exposure to PPAT-TBT-CM remained unchanged in PNT1A cells and showed a slight increase in PC3 cells. The present dissertation is the first report providing compelling evidence that TBT-induced dysregulation of PPAT can act as a driving force in the development of PCa. TBT exposure of PPAT promoted the cancer-like in both PNT1A and PC3 cells by a set of cancer cell fate and metabolic alterations. However, further studies are needed to characterize the TBT-dysregulated PPAT secretome and its underlying mechanisms of action in PCa. Thereby, the results obtained in this dissertation opened new perspectives of research to further explore the association of EDCs dysregulated PPAT with the development and progression of PCa.
- Otimização e implementação de um método de preparação de fibrilas de alfa-sinucleína para posterior desenvolvimento de um modelo animal da doença de ParkinsonPublication . Saraiva, Joana Sofia Ribeiro; Cristovão, Ana Clara Braz; Fiadeiro, Mariana Bernardo; Brito, Vanessa Sofia Figueiredo deA Doença de Parkinson é a segunda doença neurodegenerativa mais comum no mundo e é caracterizada pela perda seletiva dos neurónios dopaminérgicos na substantia nigra. A sua principal característica patológica é a formação de inclusões neuronais como os corpos de Lewy, constituídas por espécies proteicas misfolded agregadas. A alfasinucleína é uma proteína pequena envolvida no tráfico vesicular no cérebro, que compreende o modelo de polimerização-conversão-nucleação durante o seu processo de agregação. A agregação anormal promove a conversão de monómeros em fibrilas preformadas, que se acumulam nos neurónios. Deste modo, foram criados modelos animais que apresentam a forma patológica da alfa-sinucleína, cujo intuito é mimetizar a patologia, para melhor a compreender, e desenvolver novos tratamentos. A produção de fibrilas tem como objetivo a criação de fibrilas a partir de monómeros in vitro e após vários testes de controlo de qualidade das fibrilas preformadas, poder usá-las em modelos celulares ou modelos animais. Neste trabalho foi proposta a otimização de um método de preparação e formação das fibrilas preformadas com base em monómeros da alfa-sinucleína para posterior desenvolvimento de um modelo celular e animal da doença. Para avaliar a qualidade das fibrilas preformadas realizou-se o ensaio da Tioflavina T e estudou-se a estrutura secundária da proteína com base na técnica de dicroísmo circular. Os resultados deste estudo mostraram que para haver agregação proteica é necessário que a proteína se encontre na conformação correta, desordenada, desde a sua comercialização. Neste caso não foi possível obter fibrilas preformadas devido à qualidade dos monómeros comercializados, uma vez que a conformação apresentada era de a-hélice. De forma a garantir que o processo de fibrilização seja executado com sucesso é necessário refazer todo o processo de formação e avaliação de novos monómeros e fibrilas preformadas. Por outro lado, para otimizar e proporcionar a indução patológica com recurso às fibrilas preformadas da alfa-sinucleína num modelo animal é necessário fazer mais estudos que avaliem a sua caraterização e formação.