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- Patrocínio de Eventos Desportivos de Cariz Social como Estratégia de Responsabilidade Social Corporativa e Empreendedorismo SocialPublication . Pombo, Inês Pinto da Cruz; Ferreira, João José de Matos; Miragaia, DinaO objetivo deste estudo foca-se na compreensão dos motivos pelos quais as empresas apoiam/patrocinam ações ou projetos de cariz social relacionados com o desporto. Para tal foi aplicado um questionário presencial a empresas da Região da Beira Interior (N= 80), e que operam em diversos setores económicos, de forma a analisar se razões ligadas ao empreendedorismo e/ou responsabilidade social corporativa estão na origem desse envolvimento. O questionário foi composto por cinco dimensões de análise: inovação e criatividade; motivação; responsabilidade social; imagem; e vendas/dinheiro. Através de uma análise fatorial exploratória, analisou-se a confiabilidade dos factores, através do qual se dividiu os 19 itens em 4 fatores: manter clientes e motivar funcionários; inovação e criatividade; imagem da empresa; e responsabilidade social. A análise de correlações mostrou correlações fortes entre a motivação dos funcionários e a sua identificação com a empresa e entre a alteração pública sobre a conduta da empresa que combate a publicidade negativa que possa ter. O principal motivo apontado pelas empresas para apoiarem ações ou projetos desportivos de natureza comunitária é o de que acreditam que todo o tipo de empresas tem responsabilidade social, sendo o ganhar dinheiro é o último motivo apontado quando pensam em envolver-se neste tipo de iniciativas. É possível concluir que se as empresas mostrarem ações de responsabilidade social, permite-lhes melhorar o seu posicionamento no mercado e consequentemente manter clientes e motivar funcionários.
- Design of a Low Consumption Electric Car PrototypePublication . Fonte, Carlos Magno dos Reis; Silvestre, Miguel Ângelo RodriguesConcerned with environment and sustainability, Shell has organized for the last 30 years a competition of energy efficient road vehicles called Shell Eco-Marathon (SEM). The vehicle is required to achieve a minimum mean cruise speed of 25km/h and a low drag value is an essential parameter to achieve a good result. Over the years SEM teams used a streamlined body similar to an airfoil with a minimized low frontal area, however AERO@UBI team decided to create a new concept vehicle body. This 3D body also derives from a 2D airfoil, but a geometric transformation introduced by Galvão in 1968 in "Nota técnica sobre corpos fuselados", São José dos Campos, for the creation of low drag fuselage is used. According to that author, it is possible to replicate the pressure coefficient distribution of the airfoil in the 3D body. Thus, maintaining the airfoil's low drag characteristics. Through the use of CFD software ANSYS Fluent it was possible to confirm the used concept and examine the vehicle aerodynamic. Although the final result was not optimal, it was possible to confirm the theory introduced by Galvão. [...]
- O Marketing Social e as Barreiras à Dádiva de SanguePublication . Barreiro, Joana Sofia Aparício; Rodrigues, Ricardo José de Ascensão GouveiaAs controvérsias do tema do marketing social e da dádiva de sangue revelam-se importantes, uma vez que em conjunto contribuem para um melhor funcionamento dos centros de recolha de sangue, visto que os processos de angariação e fidelização de dadores demostram a carência de compreensão dos aspetos comportamentais que influenciam os indivíduos a adotar tal atitude. Dessa forma, o objectivo principal deste estudo consiste em compreender quais as barreiras que impedem os indivíduos a dar sangue. Mediante a fundamentação teórica, com base no marketing social e na dádiva de sangue, foram construídas oito hipóteses. Para confirmação das hipóteses, efetuou-se recolha de dados através de questionário, originando um total de amostra de 499 inquiridos, dos quais 174 eram dadores de sangue e 325 não. Em geral, foram confirmadas as hipóteses propostas, como tal, há a necessidade de apostar nas ações de marketing social aplicadas à dádiva de sangue, tornando mais estável as campanhas concebidas para a captação e retenção de dadores de sangue.
- Funcionalização de criogéis para purificação cromatográfica de DNA plasmídicoPublication . Brito, Andreia Sofia Costa; Almeida, Paulo Jorge da Silva; Tomaz, Cândida Ascensão TeixeiraA cromatografia é uma poderosa ferramenta preparativa e analítica e um dos métodos de purificação mais importantes aplicados em processos “downstream” no ramo da Biotecnologia. A cromatografia de afinidade é uma das técnicas de eleição na purificação de DNA plasmídico (pDNA), sendo o ligando usado um dos fatores principais para o sucesso do processo. A purificação cromatográfica de pDNA requer suportes altamente porosos devido ao seu alto peso molecular e à elevada viscosidade das suas soluções. Os criogéis são materiais poliméricos macroporosos com canais interconectados, sendo uma alternativa aos suportes particulados convencionais na purificação de pDNA. O 3,8-diamino-6-fenilfenantridina (DAPP) e o tosilato de 5-pent-4-en-1-il-fenantridínio são ligandos de origem sintética e apresentam na sua estrutura um braço espaçador e carga positiva, o que os torna potencialmente adequados para a imobilização num criogel usando e o metacrilado de 2-hidroxietilo (HEMA) como co-monómero, para posteriores estudos cromatográficos. Neste projeto, foram testados dois métodos de imobilização do ligando à matriz e dois suportes de controlo. Foram efetuados vários ensaios cromatográficos, de retenção e de separação das isoformas superenrolada (sc) e circular aberta (oc) de pDNA. Adicionalmente, testou-se a separação da isoforma sc a partir de uma amostra de lisado clarificado. Os resultados mostram que o DAPP (5 mg/mL) e o HEMA são os ligandos com melhores perfis de retenção sendo por isso escolhidos para os estudos de separação de isoformas. Tanto o DAPP como o HEMA mostraram seletividade para a isoforma sc usando como passo de ligação uma solução tampão de acetato de sódio 10 mM pH 5,0 e como passo de eluição, tampão acetato de sódio 10 mM pH 5,0 na presença de NaCl. Quanto à amostra de lisado clarificado, apenas o HEMA revelou capacidade de separação da isoforma sc dos contaminantes RNA e proteínas. Estes estudos iniciais permitiram demonstrar o potencial da aplicabilidade de criogéis com ligandos sintéticos para a separação e purificação de pDNA por cromatografia de afinidade.
- Proteomic analysis of the human vitreous humor in Retinal DetachmentPublication . Gaspar, Leonor Isabel Mesquita; Santos, Fátima Raquel Milhano dos; Tomaz, Cândida Ascensão TeixeiraOver the past few years, there has been an intensification in onset of ocular diseases among worldwide population. The incidence of eye pathologies upsurges with advancing age, leading to a decline of normal eye function and even to blindness. Ocular diseases are frequently triggered by chronic disorders, such as diabetes or hypertension, or by alterations in retinal positioning, which occurs in retinal detachment (RD). Recent studies indicates that human vitreous humor (VH) suffers proteome alterations according to the actual physiological and pathological state of the retina. However, there are few published articles regarding RD proteome. Hence, this study is focused in the proteomic analysis of VH samples in RD and posterior identification of the present proteins in these samples, as well as to understand in what way they are connected and how they act. In this way, we can get access to the VH proteome in RD patients, which is our main goal. To achieve these goals, several strategies were combined, including high abundant proteins depletion, protein fractionation and analysis by mass spectrometry (MS), in order to maximize the number of identified proteins. The final optimized strategy combined protein fractionation using liquid chromatography (LC), SDS-PAGE, and protein identification by MALDI-TOF/TOF. Using this methodology, we found 236 proteins with a 95% confidence, using ProteinPilot, where 46 proteins share common biological associations, with a minimum score of 0.900 according to STRING10. The majority of these 46 proteins are involved in regulation processes and share binding functions. Simultaneously, the same VH group sample was analyzed by LC and MALDI-TOF/TOF, in order to understand the importance of the implementation of SDS-PAGE in the process. Thus, we verified that with LC-MALDI only 110 proteins were identified. In conclusion, the developed strategy allowed to find proteins which were not identified using other proteomic strategies.
- A Qualidade das Relações Íntimas, Identidade, Estilos de Vinculação e Suporte Social em Casais LGBPublication . Jerónimo, Ana Margarida Lopes Laranjo Martins; Pereira, Henrique MarquesNo âmbito do 2.º ciclo do Curso de Psicologia, área de Psicologia Clínica e da Saúde apresenta-se a presente dissertação, que está organizada em formato de artigo, com apresentação na parte final da mesma, do anexo teórico, tal como previsto no regulamento do grau de mestre em Psicologia, da Universidade da Beira Interior. A pertinência da realização deste estudo prende-se com o facto de que cada vez mais as relações entre indivíduos do mesmo sexo aparecem de forma mais visível na nossa sociedade, no entanto, independentemente de alguns avanços no reconhecimento das mesmas, há questões sociais e legais que se mantêm, assim é necessário dar a conhecer, de forma científica e rigorosa, os indicadores e as evidências, resultantes de estudos particulares com a população LGB, em detrimento do simples derivar de investigações exclusivas com população heterossexual. O presente estudo apresenta como objetivos: 1) Avaliar os níveis de identidade, estilos de vinculação, satisfação na relação, suporte social e o bem-estar sexual subjetivo em casais LGB; 2) Comparar diferenças de identidade, estilos de vinculação, satisfação na relação, suporte social e bem-estar sexual subjetivo em casais LGB entre género e orientação sexual, idade e país de residência; 3) Determinar a correlação entre identidade, estilos de vinculação, satisfação na relação, suporte social e o bem-estar sexual subjetivo em casais LGB e 4) Descrever as relações explicativas da qualidade do relacionamento em casais LGB. Participaram neste estudo casais LGB ibéricos (Portugal e Espanha) (N=388), através do preenchimento de questionário online, disponível em língua portuguesa e espanhola. Relativamente aos resultados obtidos verificamos que os mesmos não permitem suportar a ideia de que a cultura em Portugal e Espanha interfere em constructos como a identidade total, a satisfação com a relação, o suporte social na relação, o suporte social fora da relação e o bem-estar geral. No entanto, em relação aos estilos de vinculação são os participantes espanhóis que apresentam em maior número o estilo seguro. No que concerne às dimensões prazer físico, prazer emocional e importância do sexo, embora, não se verifiquem diferenças estatisticamente significativas entre os participantes portugueses e espanhóis, em termos de satisfação com a vida sexual atual existem diferenças significativas e observamos que são os portugueses que demonstram nível superior de satisfação.
- Estudo transcultural Portugal/Brasil sobre inteligência emocional e mindfulnessPublication . Rodrigues, Maria Alexandra Alves; Esgalhado, Maria da Graça ProençaA presente dissertação tem por objectivos comparar os níveis de inteligência emocional, e de mindfulness, em função da nacionalidade, do género e da percepção de religiosidade, e analisar as associações entre inteligência emocional e mindfulness. É parte integrante desta dissertação um capítulo em formato de artigo científico para submeter a uma revista com revisão por pares, o qual descreve o estudo transcultural desenvolvido. Os instrumentos utilizados foram um questionário sociodemográfico, a Escala de Inteligência Emocional de Schutte (Schutte, Malouff & Bhullar, 2009) e o Inventário de Mindfulness de Freiburg (Walach, Buchheld, Buttenmüller, Kleinknecht & Schmidt, 2006). A amostra do estudo foi constituída por 1395 indivíduos, dos quais 624 eram portugueses e 750 eram brasileiros. Dos resultados obtidos destacam-se diferenças estatisticamente significativas em inteligência emocional (nas dimensões Gestão das Próprias Emoções e Utilização das Emoções) em função da nacionalidade, e diferenças estatisticamente significativas em mindfulness e em inteligência emocional (na escala total e em todas as suas dimensões) em função do género e da percepção de religiosidade. Verificam-se também associações positivas e moderadas, estatisticamente significativas, entre inteligência emocional e mindfulness.
- Estudo da Citotoxicidade de Compostos Derivados das Cianinas em Culturas CelularesPublication . Ferreira, Susana Marisa Azevedo; Boto, Renato Emanuel Felix; Granadeiro, Luiza Augusta Tereza Gil BreitenfeldA descoberta da mauveína, por William Perkin, em 1856, marcou a indústria da síntese de corantes. Desde então, as cianinas têm vindo a ser sintetizadas com diversos fins, nomeadamente, como sensibilizadores fotográficos. As possíveis aplicações na medicina têm vindo a ser intensivamente estudadas, como é exemplo o tratamento de tecidos tumorais, com auxílio da terapia fotodinâmica, sugerindo que há uma ação predominante na produção de espécies reativas de oxigénio, induzindo o stress oxidativo nas células cancerígenas. As glutationas S-transferases são uma superfamília de enzimas multifuncionais ubiquitárias que desempenham um papel fundamental na resposta da célula ao stress oxidativo e são consideradas enzimas de destoxificação. As enzimas envolvidas na destoxificação podem desempenhar um papel importante na suscetibilidade ao cancro. Alguns polimorfismos dos genes das glutationas S-transferases, os genes GSTM1 e GSTT1, parecem constituir um fator de risco e têm sido associados a uma maior suscetibilidade ao cancro da mama. O objetivo principal deste trabalho é efetuar um estudo preliminar sobre os efeitos das tiocarbocianinas com cadeia N-alquílica em células humanas. Para tal, utilizou-se um ensaio para estudar a viabilidade celular (ensaio de MTT) e analisou-se a expressão dos genes GSTM1 e GSTT1 por PCR em tempo real nas células epiteliais com carcinoma da mama (MCF-7), e em fibroblastos saudáveis da derme humana (NHDF), após incubação e recuperação com os compostos em estudo. Os nossos resultados mostraram que as tiocarbocianinas estudadas, com cadeia N-alquílica, demonstraram maior toxicidade na linha celular MCF-7 em comparação com as NHDF. Estas tiocarbocianinas, também mostraram, entre os possíveis mecanismos de toxicidade, o envolvimento em processos que promovem o stress oxidativo às células.
- Influência da tecnologia de purificação e estabilização na atividade biológica do microRNAPublication . Quelhas, Ana Rita Trindade; Sousa, Ângela Maria Almeida de; Sousa, Fani Pereira deAté há pouco tempo, a molécula de RNA era ainda negligenciada em comparação com o DNA e proteínas, sendo descrito como um simples intermediário no fluxo da informação genética. No entanto, ao longo dos últimos anos o RNA tem sido associado a uma multiplicidade de processos biológicos, sendo hoje em dia, intitulado como um componente celular surpreendente. A investigação em torno da molécula de RNA tem levado a inúmeras descobertas biologicamente importantes e ao desenvolvimento ou aperfeiçoamento de novas abordagens terapêuticas. Um tipo de RNA que tem sido amplamente estudado, devido à potencial aplicação terapêutica, é o microRNA (miRNA). Este RNA pertence à classe dos RNAs de baixo peso molecular que regulam a expressão génica, e a sua desregulação tem sido associada a diversas patologias. Ainda assim, a necessidade de obter o RNA puro e intacto é extremamente relevante considerando esta vertente de aplicação clínica, e quer o seu isolamento quer a etapa de purificação e armazenamento apresentam-se como passos críticos devido à possível degradação do RNA, o que pode prejudicar a sua estabilidade estrutural e consequentemente a sua atividade biológica. Desta forma, torna-se fundamental garantir a estabilidade da molécula após todas as etapas do processo, visando a sua aplicação. Deste modo, o objetivo global deste estudo consiste no desenvolvimento e implementação de uma nova metodologia que permita manter a conformação nativa e atividade biológica do RNA, após todas as etapas críticas do seu processamento. Inicialmente foram realizados estudos cromatográficos baseados em cromatografia de afinidade com ligandos de aminoácidos, nomeadamente a matriz de L-metionina-agarose, para obter o pre-miR-29 com elevado grau de pureza. Como estes resultados não foram conclusivos, e não foi possível a separação eficiente do pre-miR-29, os estudos de estabilização foram realizados com RNA total. Assim, foram realizados ensaios de dicroísmo circular (DC) para avaliar a estabilidade estrutural do RNA, após o seu isolamento e incubação com diferentes classes de excipientes, nomeadamente sais (EDTA, citrato de sódio e acetato de sódio) e aminoácidos (histidina, prolina e arginina) nas concentrações de 1, 25 e 100 mM, e açúcares (sorbitol, trealose e sacarose) a 295 e 595 mM. O estudo de estabilidade inclui ainda a avaliação da estabilidade em função do tempo (7, 15 e 30 dias) e temperatura de armazenamento (4, -20 e -80ºC). De uma maneira geral, estes testes preliminares indicaram que o RNA na presença de EDTA ou arginina na concentração de 1 mM, conservados a 4ºC e -80ºC, mantém a sua estabilidade conformacional. Considerando os resultados obtidos, e para confirmar a ação estabilizadora dos aditivos na manutenção da atividade biológica do RNA foi usado como modelo o pre-miR-29. Estudos recentes apontam para uma alteração dos níveis deste miRNA na doença de Alzheimer (DA). Em condições fisiológicas, o pre-miR-29 pode atuar diretamente sobre a enzima ß-secretase 1 (BACE 1) responsável pela clivagem da proteína percursora amilóide (APP) e desta forma diminuir os depósitos extracelulares dos péptidos ß-amilóides (Aß). Estes estudos revelam a possibilidade da aplicação do pre-miR-29b como um alvo terapêutico, já que a reposição dos seus níveis nas células neuronais poderá induzir o silenciamento da BACE 1 e redução dos níveis dos péptidos Aß. Assim, no âmbito deste trabalho, o pre-miR-29 recombinante foi preparado e armazenado nas condições que apresentaram melhores resultados de estabilização, no dicroísmo circular, para posteriormente ser avaliada a sua atividade biológica, nomeadamente no que se refere à capacidade de reduzir os níveis de expressão da BACE 1. Após a produção do pre-miR-29, este foi purificado com a matriz de L-arginina-Sepharose, e foram realizados estudos de transfeção das células N2a695. Os resultados obtidos demonstraram que o pre-miR-29 incubado com arginina a -80ºC durante 30 dias apresenta uma diminuição da expressão do mRNA da proteína hBACE 1 de cerca de 90-100%, quando comparado com as outras condições de armazenamento testadas.
- Análise do Papel Neuroprotetor da Proteína DJ-1 na Doença de ParkinsonPublication . Jacinto, Daniela Filipa Flores; Baltazar, Graça Maria FernandesO stresse oxidativo é considerado um dos fatores chave no desencadeamento e progressão de diversas doenças neurodegenerativas. Uma vez que a perda progressiva de neurónios dopaminérgicos na substância nigra pars compacta constitui a principal característica da doença de Parkinson e que esta população neuronal está sujeita a elevados níveis de stresse oxidativo, sugere-se que este possa estar na base da grande vulnerabilidade destes neurónios. A DJ-1 é uma pequena proteína com papel neuroprotetor em situações de stresse oxidativo e que tem sido associada à DP esporádica. Apesar das múltiplas funções atribuídas a esta proteína, o seu papel neuroprotetor possui grande relevância nesta patologia, uma vez que ela funciona como um sensor de stresse oxidativo. A DJ-1 é expressa quer por neurónios, quer por astrócitos, localizando-se no citoplasma, núcleo celular, mitocôndria e também extracelularmente. A sua libertação para o meio parece ser facilitada por oxidação. Este trabalho pretendeu avaliar o papel protetor da DJ-1 extracelular usando como modelo experimental culturas primárias de neurónios do mesencéfalo ventral e co-culturas de neurónios e astrócitos. A lesão neuronal foi induzida por exposição ao estímulo oxidante, H2O2, numa concentração à qual apenas os neurónios dopaminérgicos foram lesados. Ao contrário do esperado a lesão dopaminérgica não foi afetada pela presença de astrócitos. Estudos de imunodepleção da DJ-1 presente no meio mostraram que esta promove a proteção dopaminérgica quer em condições controlo quer após exposição a lesão oxidativa. Por quantificação da DJ-1 presente no meio mostrámos que esta é secretada e que a exposição a H2O2 estimula a sua libertação. Com recurso ao uso de DJ-1 conjugada ao fluoróforo Alexa 488 confirmámos a capacidade dos neurónios em captar a proteína extracelular. No entanto, apenas uma pequena percentagem dos neurónios apresentaram incorporação significativa e curiosamente nenhum dos neurónios dopaminérgicos presentes incorporou a proteína marcada, pelo que não é clara a relevância desta recaptura para a proteção neuronal observada. Em conjunto os resultados obtidos mostraram que neurónios e astrócitos mesencefálicos têm a capacidade de libertar DJ-1, quer em condições basais quer em condições oxidantes, e que a proteína secretada para o meio é relevante para a sobrevivência dopaminérgica. Verificámos ainda que a DJ-1 extracelular pode ser recaptada por neurónios, o que sugere uma ação parácrina desta proteína.