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- Characterization of the testicular transcriptome of transgenic rat overexpressing regucalcin: insights into (in)fertilityPublication . Santos, Vanessa Sofia Mesquita; Socorro, Sílvia Cristina da Cruz Marques; Pinto, Patrícia Isabel Silvestre; Correia, Sara Carina de LimaRegucalcin (RGN) is a highly-conserved calcium (Ca2+)-binding protein, which was initially identified in the rat liver, playing a role in intracellular Ca2+ homeostasis. Over the last years, RGN was identified in several non-reproductive and reproductive tissues and, due to its modulation of Ca2+ levels, and regulation of Ca2+-dependent and -independent enzymes, the panoply of RGN known functions has been widening. RGN has thus also been involved in the regulation of intracellular signaling pathways, oxidative stress and metabolism, as well as important biological processes such as cell proliferation and apoptosis. RGN is encoded by the Rgn gene, identified as an androgen-target gene broadly expressed in all testicular cell types, which for the first linked RGN with male reproduction. More recently, transgenic rats overexpressing RGN (Tg-RGN) have been shown to display increased sperm viability with lower incidence of tail defects, as well as resistance to oxidative stress and to chemical- or radiation-induced apoptosis. Despite the different evidences supporting the beneficial role of RGN in spermatogenesis, the molecular players underlying its actions are not yet known. The present study aimed to identify the pathways and molecular players underlying the cytoprotective actions of RGN in spermatogenesis. For this purpose, the testicular transcriptome of Tg-RGN rats compared to wild-type (Wt) rats was analyzed using an RNA sequencing approach (RNA-seq). Differentially expressed genes were clustered according to their expression pattern, gene ontology (GO) and pathway enrichment analysis. A total of 1064 genes were differentially expressed in the Tg-RGN rats with higher enrichment scores found for GO terms for biological processes such as ion transport or meiotic cell cycle. The obtained information was then filtered considering fold-change, expression level and the potential relevance for spermatogenesis, and 10 genes were selected for real-time quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (qPCR) validation of the RNA-seq results. Atp10b, Orai1, Sfrp2 and Tnni1 genes were validated as being up-regulated genes in the testis of Tg-RGN rats, whereas Fign and Sycp1 genes were down-regulated, which suggests their likely role as RGN partners in modulating spermatogenesis. Afterwards, the expression of the 10 selected genes in different types of testicular cells was investigated. For this purpose, a cell line with spermatogonia stem cell characteristics (GC-6spg cells) and primary Sertoli Cells (SCs) isolated from Wt rats were used. Gene expression was assessed by reverse transcription PCR (RT-PCR). All differentially expressed genes, with the exception of Atp10b, were expressed in SCs; Eng, Fign, Orai1, Star, Sycp1 and Tnni1 genes were also detected in GC-6spg cells. Overall, the findings obtained in the present thesis gave a new insight into the molecular mechanisms behind RGN’ actions in the testes and provided the basis for future research exploring and deepening the knowledge about the role of RGN in the regulation of spermatogenesis and male (in)fertility.
- Desenvolvimento de uma formulação líquida formadora de película para aplicação vulvarPublication . Vieira, Ana Beatriz Ribas; Oliveira, Rita Manuela Palmeira de; Oliveira, José António Martinez Souto deO presente relatório de estágio está inserido na unidade curricular “Estágio” do Mestrado Integrado em Ciências Farmacêuticas e demarca o término do percurso de aprendizagem. Encontra-se dividido em três capítulos distintos: Investigação Laboratorial, estágio em Farmácia Comunitária e estágio em Farmácia Hospitalar. O primeiro capítulo foi desenvolvido no Centro de Investigação em Ciências da Saúde da Universidade da Beira Interior e denomina-se “Desenvolvimento de uma formulação líquida formadora de película para aplicação vulvar”. A vulvodínia é um síndrome caracterizado pela dor que afeta muitas mulheres em todo o mundo. Para o tratamento, a aplicação cutânea (local) de medicamentos é uma das abordagens utilizadas, sendo imperativo formular produtos adaptados às características da vulva. A necessidade da aplicação repetida de medicamentos em zonas como a pele e mucosa é resultado, parcialmente, da sua fácil remoção, a qual condiciona ainda a sua eficácia e diminui a adesão à terapêutica das respetivas formulações. Neste trabalho foi desenvolvido o protótipo de uma formulação líquida formadora de película contendo óleos essenciais: esta baseia-se na capacidade do álcool polivinílico formar filmes, com o benefício de ser um excipiente considerado inócuo. Foi possível emulsionar os óleos essenciais de forma eficiente numa das formulações de base iniciais, obtendo-se um produto final com características satisfatórias e com capacidade de formar película na pele. O estágio em Farmácia Comunitária foi desenvolvido na Farmácia da Calçada em Paredes de Coura, sob orientação da Doutora Eduarda Moita. O presente relatório pretende evidenciar as principais responsabilidades do Farmacêutico Comunitário, bem como o enquadramento em que esta atividade está inserida. O terceiro capítulo é referente ao estágio em Farmácia Hospitalar, desenvolvido nos Serviços Farmacêuticos do Centro Hospitalar Cova da Beira, sob orientação da Dra. Olímpia Fonseca. Nele são relatadas as principais atividades dos Farmacêuticos Hospitalares, assim como o contexto em que a farmácia hospitalar atua e está inserida.
- Atividade Física e Saúde Mental em Pessoas Idosas Institucionalizadas da Beira InteriorPublication . Sousa, Daniela Conceição Alves; Afonso, Rosa Marina Lopes Brás Martins; Pereira, Henrique MarquesCom o aumento da população idosa em todo o mundo surgiu a preocupação e a necessidade de se desenvolverem estudos sobre longevidade e qualidade de vida na velhice. A saúde mental é uma das dimensões a promover para um envelhecimento saudável que se encontra relacionadas com inúmeros fatores, entre eles o exercício e a atividade física. O objetivo desta dissertação é avaliar a saúde mental e a atividade física e analisar a relação entre estas duas dimensões em pessoas idosas institucionalizadas. Este estudo integra-se no projeto Interdisciplinary Challenges On Neurodegeneration (ICON- CICS & UBI), que pretende identificar fatores de risco, promover a deteção precoce e o desenvolvimento de tratamentos inovadores para doenças neurodegenerativas. Participaram neste estudo 91 pessoas idosas institucionalizadas, com uma média de idade de 82.32 anos (DP = 7.10), sendo a maioria do sexo feminino (72.5%), viúvos (61.5%) e com o 4ºano de escolaridade (44.0%). Os participantes responderam à escala Brief Symptom Inventory (BSI) (Derogatis, 1982, adap. para a pop. Portuguesa por Canavarro, 1999) e o International Physical Activity Questionnaire (IPAQ) (Craig et al., 2003). Os resultados indicam 83.5% dos participantes apresentam valores sugerem a presença de alguma perturbação psicopatológica e que apresentam baixas taxas de atividade física, sendo que foi observado que 2.2% da amostra total praticam atividade física vigorosa, 15.4% da atividade física moderada e 38.5% atividades leves. O grupo de participantes de atividade física moderada é o que apresenta uma média mais baixa de sintomas psicopatológicos. Observaram-se correlações estatisticamente significativas entre alguns parâmetros de atividade física e algumas dimensões psicopatológicas (Somatização, Depressão e Índice de Sintomas Positivos) que sugerem que mais elevado grau de atividade física e menor sedentarismo correlacionam com mais saúde mental em idosos institucionalizados. Os resultados afirmam a necessidade de se avaliarem e valorizarem as questões relacionadas com os sintomas psicopatológicos na velhice. Sugerem, ainda, que a atividade física moderada pode ser benéfica para os idosos institucionalizados o que sugere a importância de se promover atividade física, através da implementação de estratégias adequadas para se reduzir o sedentarismo no contexto institucional como forma de se promover a saúde mental na velhice.
- Análise do Consumo de Novos Anticoagulantes Orais no Centro Hospitalar Universitário Cova da BeiraPublication . Fernandes, Marta Sofia Gomes; Morgado, Manuel Augusto Nunes Vicente Passos; Marcos, Jorge MartinezSendo o farmacêutico um profissional de saúde muito próximo da população e que integra equipas multidisciplinares, o Mestrado Integrado em Ciências Farmacêuticas está organizado de forma a permitir o contacto dos futuros farmacêuticos com as principais vertentes da profissão. Assim, o presente trabalho divide-se em três capítulos: Capítulo I – projeto de investigação desenvolvido; Capítulo II e III – relatórios dos estágios em farmácia hospitalar e comunitária, respetivamente. No Capítulo I foi feita uma abordagem sobre os novos anticoagulantes orais, de forma a expor as vantagens dos inibidores da trombina (dabigatrano) e do fator Xa (rivaroxabano, apixabano e edoxabano). Estes são administrados por via oral, em doses fixas, sem haver necessidade de monitorização regular e apresentam poucas interações medicamentosas. Por estes motivos começaram a ser considerados uma alternativa viável à varfarina – anticoagulante mais prescrito. Os ensaios clínicos publicados compararam cada um dos fármacos às terapêuticas convencionais. Os resultados revelam uma eficácia equivalente na prevenção de acidentes vasculares cerebrais e tromboembolismos e um perfil de segurança bastante favorável, notando-se que, em alguns casos, os novos anticoagulantes causam menos hemorragias. Foi objetivo deste trabalho, também, o estudo das prescrições dos novos fármacos em doentes internados no Centro Hospitalar Universitário Cova da Beira, sendo possível afirmar que a sua utilização é crescente e ultrapassou o consumo de varfarina, no período de estudo. O Capítulo II relata as diferentes funções do farmacêutico em meio hospitalar, desempenhadas no estágio no Centro Hospitalar de Trás-os-Montes e Alto Douro, desde dia 22 de janeiro a 16 de março. Como futura profissional, o contacto com o ambiente hospitalar foi importante para aprofundar conhecimentos acerca de terapias farmacológicas específicas e exclusivas de hospitais. No Capítulo III são descritas as ações desenvolvidas enquanto estagiária na Farmácia Barreira, durante o período de 19 de março a 1 de junho. Estas permitiram-me percecionar a relevância da interação farmacêutico-utente e do acompanhamento das terapêuticas, tendo sempre presente o espírito de missão e humanidade que a profissão acarreta.
- Prostate Cancer Metabolism in the Interplay of Obesity and Estrogens ActionsPublication . Monteiro, Joana Filipe Gomes Araújo Macário; Socorro, Sílvia Cristina da Cruz Marques; Vaz, CátiaCancers have a common ability of reprogramming energy metabolism, which is known as a hallmark of cancer. In order to satisfy their needs, cancer cells reorganized metabolic activity upregulating glycolysis rate, which allows cells to maintain high biosynthesis levels of lipids and other macromolecules, sustaining high proliferation rates. The high energy demands of cancer cells are fulfilled by anaerobic glycolysis, even in the presence of oxygen, which results in high rates of lactate production. The excess of lactate exported to the extracellular medium increases acidity and suppresses host anticancer immunity, which favours cancer cells growth and invasion. Besides glucose, fatty acids are another important energetic source, and its oxidation and biosynthesis seems to be augmented in cancer cells. Androgens are well-known drivers in development and progression of PCa. In addition, in hormone-dependent cancers, such as breast and prostate cancer, steroid hormones have been identified as important modulators of metabolic pathways. Our research group and others have demonstrated the role of androgens as stimulators of PCa by modulating glucose consumption and lactate production, as well as the distinct metabolic profile between non-neoplastic cell line, PNT1A, and neoplastic cell lines, LNCaP and PC3. However, in the last years, estrogens had also been implicated in the carcinogenesis of the prostate, despite some studies defend their protective effect. Obesity is a worldwide epidemic characterized by a disruption in adipose tissue that is associated with a stage of hyperestrogenism. In addition, obesity has been identified as a factor for aggressiveness and poor prognosis of PCa. The present work aims to evaluate the role of 17ß-Estradiol (E2) on modulating the glycolytic metabolism and lipid metabolism in human prostate cell lines, and to understand its action as stimulator of the development and progression of PCa. Non-neoplastic (PNT1A) and neoplastic (LNCaP and PC3) human prostate cell lines were cultured in presence or absence of 0,1; 1 e 100 nM de E2 for 24, 48 e 72 h. The 1 nM concentration and a treatment period of 48 h were the conditions selected to evaluate the effect of E2 on glycolytic and lipid metabolism in all cell lines under study. Protein expression and activity of target modulators of these biological processes were assessed by means of Western blot analysis and biochemical assays. The obtained results showed that treatment with E2 augmented glucose consumption and lactate production in PNT1A, LNCaP and PC3 cell lines. These results were underpinned by the increased expression or activity of glucose transporters and glycolytic enzymes. Besides that, E2-treatment increased the expression of lipid regulators in all cell lines, which demonstrate its action regulating lipid metabolism. To conclude, the obtained results showed that E2 might have a role in the development and progression of PCa by stimulating the glycolytic and lipid metabolism in both non-neoplastic and neoplastic cells. Moreover, the evidence gathered hereom follow the studies that defend the causative role of E2 in PCa. Finally, a relationship between estrogens, obesity and PCa might be likely established since hyperestrogenism may increase the odds for tumour development and invasion by potentiating the metabolic reprogramming of cancer cells.
- Iniciativa de crescimento pessoal e crenças sobre a violência conjugal em estudantes universitáriosPublication . Melo, Maura Rodrigues; Loureiro, Manuel Joaquim da SilvaO presente estudo foi desenvolvido com o intuito de avaliar os níveis de iniciativa de crescimento pessoal e as crenças sobre a violência conjugal em estudantes universitários e verificar uma possível associação entre as duas variáveis. A iniciativa de crescimento pessoal refere-se à capacidade de fazer mudanças pessoais e promover o próprio processo de crescimento, de forma ativa e intencional. A violência conjugal é um fenómeno complexo, transversal e multideterminado, que atravessa gerações, diferentes faixas etárias, meios socioeconómicos, culturas e ambos os sexos. As crenças sobre a violência conjugal influenciam a perceção que as pessoas têm sobre o fenómeno e podem contribuir para a perpetração e normalização do mesmo. Neste sentido, foram administrados o questionário sociodemográfico, a Escala de Iniciativa de Crescimento Pessoal (Robitschek, 1998, 2012) e a Escala de Crenças sobre Violência Conjugal (Matos, Machado e Gonçalves, 2000). A amostra é constituída por 273 estudantes do 1º ano, do 1º ciclo de uma universidade pública portuguesa, sendo que 117 (42.9%) são do género masculino e 156 (57.1%) são do género feminino e a média de idades foi de 19.24. De acordo com os resultados, a amostra em estudo apresenta uma baixa tolerância com as crenças que legitimam a violência conjugal e níveis moderadamente elevados de iniciativa de crescimento pessoal. Verificou-se que são os alunos do género masculino e do curso de Ciências do Desporto que legitimam mais a violência. Relativamente à iniciativa de crescimento pessoal e às variáveis sociodemográficas estudadas, não se verificaram diferenças estatisticamente significativas. Por fim, não se verificou uma associação significativa entre as crenças sobre a violência conjugal e a iniciativa de crescimento pessoal, contudo verifica-se uma associação positiva entre o fator 4 da Escala de crenças sobre violência conjugal “legitimação da violência pela preservação da privacidade familiar” e o fator 3 da Escala de Iniciativa de crescimento pessoal “Usar recursos”.
- Atividade Física e Cognição em pessoas idosas institucionalizadasPublication . Gomes, Catarina Coelho; Afonso, Rosa Marina Lopes Brás Martins; Pereira, Henrique MarquesO envelhecimento da população é um fenómeno que tem ocorrido a nível mundial e a um ritmo acelerado. O envelhecimento encontra-se associado a perdas em vários domínios, nomeadamente o cognitivo e o físico. A atividade física e o funcionamento cognitivo encontram-se relacionados, podendo ser promovidos de forma conjunta ou separada através de diferentes estratégias como forma de melhorar a qualidade de vida com que se envelhece. Este estudo insere-se, no projeto Interdisciplinary Challenges On Neurodegeneration (ICON- CICS & UBI) e pretende avaliar o funcionamento cognitivo, caracterizar a atividade física e analisar a relação entre estas duas dimensões numa amostra de pessoas idosas institucionalizadas. Participaram no estudo 91 idosos institucionalizados, 67 (73,6%) do sexo feminino e 24 (26,4%) do sexo masculino, com idades compreendidas entre 66 e 101 (M=82.32; DP=7.09). Os instrumentos utilizados foram o Addenbrooke's Cognitive Examination-Revised (ACE-R) e o International Physical Activity Questionnaire (IPAQ). Os resultados deste estudo evidenciam que os idosos institucionalizados apresentam baixos níveis de atividade física, 2 pessoas (2.2%) praticam atividade física vigorosa, 12 (13.2%) realizam atividade física moderada, 24 (26.4%) atividade física leve (caminhada) e as restantes 56 pessoas (61.5%) não realizam atividade física. Quanto à cognição, 24 (26.4%) apresentam défice cognitivo e 67 (73.6%) não têm défice. Os resultados apontam para a existência de diferenças estatisticamente significativas nos domínios da Atenção e Orientação (U=0.009; p=.01), Linguagem (U=0.012; p<.05), Memória (U=0.036; p<.05) e no ACE-R Total (U=0.013; p<.05) entre participantes do sexo feminino e masculino, sendo que os homens apresentam um melhor desempenho. Os resultados mostram uma correlação muito fraca ou praticamente nula, entre o domínio da Atenção e Orientação e o tempo que o idoso caminha por dia (r=.272; p<.05); no domínio Visuoespacial e dias por semana que caminha durante 10 minutos (r=.321; p<.01); no domínio Visuoespacial e o número de horas sentado durante a semana e o fim de semana (r=-.226; p<.05) e entre o domínio da Memória e o tempo que caminha por dia (r=.405; p<.01). Os resultados deste estudo destacam os baixos níveis de atividade física dos idosos institucionalizados e indicam a existência de uma relação que é estatisticamente significativa, entre a atividade física e alguns domínios da cognição (memória e visuoespacial). Neste sentido, estes resultados alertam para os baixos níveis de atividade física dos participantes, e sugerem que poderá existir uma relação entre o funcionamento cognitivo e a atividade física.