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- Recombinant pre-miRNA-29b: Extracellular production and purificationPublication . Bento, José Pedro Santos; Sousa, Fani Pereira de; Carapito, Ana Rita Mugeiro; Cruz, Carla Patrícia Alves Freire Madeira daA terapia baseada em RNA tem avançado rapidamente, trazendo desenvolvimentos promissores para o tratamento de diversas doenças. Os RNAs podem ser divididos em codificantes e não codificantes (ncRNAs), sendo que os não codificantes têm vindo a ganhar grande interesse visto que possuem a função de regulação da expressão génica. Os microRNAs (miRNAs ou miRs) são um exemplo de ncRNAs, que regulam a expressão génica a nível pós-transcricional e controlam processos biológicos com precisão notável, ligando-se de forma complementar aos mRNAs alvo, modulando assim a expressão génica. O pre-miRNA-29b é um desses miRNAs e já é reconhecido por estar envolvido nos mecanismos patológicos associados à doença de Alzheimer. Neste caso, os baixos níveis de miRNA-29b em doentes de Alzheimer, associado à expressão elevada da proteína BACE1, leva à acumulação dos péptidos Aß, que podem depositar, conduzindo à degeneração dos neurónios, comprometendo a função cognitiva. Logo este pre-miRNA-29b pode ser considerado como potencial biomarcador ou agente terapêutico para esta doença. Mas neste momento a produção em larga escala de RNA para aplicações terapêuticas envolve um processo complexo que exige estratégias de produção e purificação eficientes e controlo de qualidade rigoroso para garantir a pureza e a atividade biológica do RNA. No entanto, os métodos mais comuns para a produção de RNA são a síntese química ou enzimática, que apresentam limitações em termos de quantidade e qualidade do RNA produzido. Nesse contexto, a produção recombinante pode ser uma alternativa para superar alguns desses desafios, uma vez que é um método mais económico e de fácil transposição para larga escala. Foi escolhida a bactéria Rhodovulum sulfidophilum, que é uma bactéria púrpura marinha, que apresenta a vantagem de secretar RNAs para o meio extracelular, sem libertar RNases. Com isso, a recuperação do RNA pode ser consideravelmente simplificada em comparação com os protocolos padrão de extração intracelular, facilitando o subsequente processo de purificação, que é a etapa mais crítica e dispendiosa de todo o processo de preparação de RNAs. Este trabalho teve como foco a otimização da produção extracelular de pre-miRNA-29 assim como a sua subsequente purificação. As condições de crescimento bacteriano foram otimizadas de forma a garantir os níveis máximos da molécula alvo, monitorizando a produção em diferentes tempos de cultura (24 h, 36 h, 48 h e 60 h) e usando diferentes temperaturas (25 ºC, 30 ºC e 37 ºC) para o crescimento bacteriano. De modo geral, os níveis mais elevados de pre-miRNA-29b foram obtidos após 48 horas de crescimento a 25 ºC (0.23 ng/mL de meio), porém, para a continuidade dos estudos, foi escolhida a segunda melhor condição, de 36 horas de cultura a 30 ºC (0.08 ng/mL de meio), uma vez que o erro associado às medições nesta condição era menor, e consistia num tempo de cultura mais curto, rentabilizando assim a duração do processo. Quanto à purificação do pre-miRNA-29b, foi selecionado um suporte cromatográfico multimodal, Capto Q Impres, que demonstrou um desempenho promissor na interação seletiva com o RNA alvo. Realizou-se uma otimização inicial para avaliar o impacto da concentração de NaCl nas etapas de ligação e eluição, assim com o pH usado (7 ou 8) Adicionalmente, foi testado o efeito da pré-purificação da amostra por cromatografia de exclusão molecular e também analisada a importância de concentração da amostra antes de prosseguir para o passo de purificação. Foram ainda realizadas comparações quanto à massa de amostra aplicada na coluna, bem como a análise das diferenças entre as amostras intracelulares e extracelulares. Após a avaliação preliminar, foi aplicado um DoE na tentativa de melhorar o desempenho do processo de purificação. Os parâmetros de otimização incluíram a concentração de NaCl durante as etapas de equilíbrio e eluição, bem como o pH do tampão. Desta forma foi possível otimizar o processo de produção extracelular de pre-miRNA-29b em Rhodovulum sulfidophilum e também desenvolver um processo promissor para a sua posterior purificação.
- Bitcoin ou Dólar como Hedge para o Ibovespa? Resultados para o Mercado Financeiro BrasileiroPublication . Benevides, Pedro Falcão; Silva, Pedro Miguel Ramos Marques daA crescente globalização dos mercados financeiros tem intensificado a busca por ativos que possam atuar como hedge contra a volatilidade. Este estudo investiga o Bitcoin e o Dólar Americano como potenciais instrumentos de proteção em relação ao Ibovespa, o principal índice da bolsa de valores brasileira. A pesquisa utiliza modelos de volatilidade condicional, como o FIGARCH e o DCC-FIGARCH, para analisar dados diários de retornos de fevereiro de 2018 a janeiro de 2023, um período que inclui eventos de alta incerteza, como a pandemia de COVID-19. Os resultados indicam que o Bitcoin, embora altamente volátil, apresenta correlação limitada com o Ibovespa, sugerindo seu potencial como ativo de diversificação em momentos de crise. O Dólar, por sua vez, demonstrou maior persistência da volatilidade e uma correlação mais forte com o Ibovespa, consolidando sua posição como ativo de refúgio em momentos de incerteza. Entretanto, a correlação condicional dinâmica mostrou que nenhum dos dois ativos se comporta como hedge perfeito no longo prazo em relação ao Ibovespa. O estudo conclui que, embora o Bitcoin e o Dólar ofereçam alguma proteção contra as flutuações do Ibovespa, o comportamento desses ativos varia significativamente de acordo com as condições de mercado, destacando a importância de uma análise contínua e adaptada ao contexto econômico global e local.
- Estratégias de Capacitação para o aumento da Prática Feminina nas modalidades de Futebol e FutsalMateus, Ana Beatriz Gonçalves; Ferreira, João José de Matos; Miragaia, Dina Alexandra MarquesA luta pela igualdade entre homens e mulheres é ainda uma constante. Nos clubes de futebol e futsal existe uma cultura organizacional muito assente numa base masculina, ainda que aos poucos o papel da mulher tenha vindo a conquistar uma posição mais justa e igualitária. Ainda assim, atualmente, os clubes começam a percecionar a necessidade de mudança, e têm vindo a demonstrar uma preocupação em aumentar o número de mulheres em vários âmbitos de intervenção, quer ao nível da gestão, quer enquanto praticantes. Nestas circunstâncias, a mudança não é um processo simples, sendo necessário que as organizações sejam capazes de criar ambientes inclusivos, com intenção de gerar mudanças verdadeiras a curto e longo prazo e que sejam capazes de proporcionar oportunidades iguais para homens e mulheres. Esta pesquisa agrega dois estudos. O estudo 1 teve como objetivo analisar de que forma a comunidade científica tem estudado a participação feminina no desporto sob o ponto de vista estratégico. Com base na revisão de literatura e no modelo conceptual formulado no estudo 1, foi desenvolvido o estudo 2 que consistiu num estudo quantitativo de uma amostra de 317 clubes nacionais de futebol e futsal, com o objetivo de testar empiricamente as hipóteses de investigação formuladas e avaliar o papel do processo de capacitação das organizações desportivas para atingirem resultados no aumento da participação desportiva feminina. Os resultados mostraram a relevância da prontidão e do desenvolvimento estratégico no processo de capacitação dos clubes para a prática desportiva feminina. Este estudo contribui para um maior conhecimento das estratégias que as organizações desportivas podem adotar para a captação de atletas femininos. Em termos práticos, pode auxiliar as organizações no processo de tomada de decisão estratégica relativamente ao processo de capacitação, com vista a envolver uma maior participação feminina para a prática desportiva, nomeadamente no caso do futebol e futsal.