Faculdade de Ciências
Permanent URI for this community
Browse
Browsing Faculdade de Ciências by Field of Science and Technology (FOS) "Ciências Naturais::Ciências Químicas"
Now showing 1 - 10 of 74
Results Per Page
Sort Options
- Acanthus mollis como fonte de compostos biologicamente ativosPublication . Marques, Mariana Ribeiro; Amaral, Maria Emília da Costa Cabral; Duarte, Ana Paula CoelhoA utilização de plantas medicinais para a prevenção o e tratamento de doenças é uma das mais antigas práticas medicinais do homem. A determinação dos constituintes bioativos de uma planta com potencial terapêutico, oferece variadíssimas oportunidades para a descoberta e desenvolvimento de novos fármacos. Neste contexto, o objetivo geral deste trabalho foi melhorar o conhecimento sobre as propriedades biológicas de extratos obtidos a partir do Acanthus mollis, L. (acanto), uma espécie sobre a qual são praticamente inexistentes estudos científicos, e a sua possível valorização como fonte de produtos naturais para uso terapêutico e/ou nutracêutico. Neste estudo avaliou-se o potencial antioxidante e citotóxico de extratos metanólicos e etanólicos de folhas e flores do acanto. Para alguns grupos de metabolitos secundários (fenóis, flavonoides e alcaloides) determinaram-se alguns dos compostos fitoquímicos, bem como, a influência do procedimento de extração, usando a extracção em Soxhlet e extração assistida por ultrassons, contemplando neste caso, o tamanho de partícula. O teor médio em fenóis totais foi avaliado pelo método do reagente de Folin-Ciocalteu; para quantificar os flavonoides totais recorreu-se ao método colorimétrico com cloreto de alumínio e o teor de alcaloides totais foi estimado pelo método do reagente de Dragendorff. A atividade antioxidante foi determinada pelo teste do 2,2-difenil-1-picril-hidrazil (DPPH). A avaliação da citotoxicidade foi feita pelo teste do brometo de 3-[4,5-dimetiltiazol-2-il]-2,5-difeniltetrazólio (MTT) para a viabilidade celular e a proliferação foi analisada através do doseamento de proteínas por ácido bicinconínico (BCA). A maioria dos extratos estudados apresentam um teor significativo de metabolitos secundários (fenóis, flavonoides e alcaloides), sendo o método de extração por ultrassons o que apresentou melhores resultados, nomeadamente para o menor tamanho de partícula. Os resultados obtidos mostraram que o teor em fenóis totais, variou entre 57,4 ± 7,67 e 200,5 ± 2,86 miligramas de equivalentes de ácido gálico (mg EAG) por grama de matéria seca. Os flavonoides totais e ao alcaloides apresentam teores que variam entre 13,8 ± 1,03 e 57,2 ± 2,24 miligramas de equivalentes de quercetina (mg EQ) por grama de matéria seca, e 50,4 ± 0,004 e 746,0 ± 0,03 miligramas de equivalentes de nitrato de pilocarpina (mg ENP) por grama de matéria seca. Os resultados para o índice de atividade antioxidante variaram entre 0,90 ± 0,03 e 1,61± 0,31 para os extratos, mostrando que todos eles apresentaram uma atividade antioxidante significativa. Nos estudos de citotoxicidade todos os extratos provaram ser citóxicos para células do adenocarcinoma da mama humano (MCF-7) e o extrato metanólico das flores, obtido por Soxhlet, apresenta toxicidade seletiva para estas células relativamente aos fibroblastos dérmicos normais humanos (NHDF).
- Ações da vitamina D na regulação da Regucalcina no cancro da próstataPublication . Rodrigues, Ana Margarida Pereira; Batista, Cláudio Jorge Maia; Socorro, Sílvia Cristina da Cruz MarquesCancro da próstata é o segundo cancro maligno mais diagnosticado na população masculina. Baixos níveis de vitamina D tem sido associados ao desenvolvimento e/ou progressão do cancro da próstata. Vitamina D pode ser produzida na pele, durante a exposição solar, ou provinda da dieta. Calcitriol, a forma ativa da vitamina D, quando ligada ao seu recetor, regula a expressão de uma variedade de genes que estão associados com a homeostase do cálcio e também associados ao crescimento celular, diferenciação e apoptose. Esta hormona é então um regulador da homeostase de cálcio intracelular, mas também um modulor efetivo da proliferação celular e da diferenciação em diferentes tipos de células, como é o caso do cancro da próstata. O desequilíbrio entre a morte celular e a proliferação, está na base da carcinogénese e a transformação maligna das células tem sido associada a alterações na sinalização de cálcio. Regucalcina é uma proteína que tem como papel importante na manutenção da homeostase de cálcio e também na regulação da expressão de algumas proteínas importantes nas vias de sinalização intracelular. Estudos do nosso grupo comprovam que a regucalcina está subexpressa no cancro da próstata. Este projeto de investigação tem como objetivo verificar o efeito anticancerígeno da vitamina D através da regulação da regucalcina. Para isso, utilizou-se a técnica de PCR em tempo real para avaliar a expressão da regucalcina nas células PNT1A, LnCap e PC3 estimuladas com a vitamina D. Nos resultados obtidos, nas linhas PNT1A e LnCaP observou-se uma diminuição significativa da expressão do mRNA regucalcina enquanto que na linha PC-3 houve uma aumento da expressão. Concluímos que possivelmente a vitamina D tem ações anticancerígenas apenas em estados tardios do cancro da próstata, aumentando a expressão da regucalcina e assim regredir a progressão do cancro.
- Affinity purification and delivery of a p53-encoding plasmid DNA for gene mediated cancer therapyPublication . Valente, Joana Filipa Abreu Pereira; Sousa, Fani Pereira deCancer is still one of the leading causes of death worldwide. In order to treat this scourge, gene therapy and DNA vaccination have been proposed as an alternative to the common treatments. Among the several gene abnormalities that could be responsible for the oncogenic process, the ones presented in p53 stands up. p53 is one of the most important tumour suppressor gene being considered the “genome guardian” since when occurs exposure to stressful stimuli it is activated through post-transcriptional modifications increasing its stability and activity. This gene is directly and indirectly implicated in different cellular functions, including DNA damage repair, cell cycle arrest in G1/S and apoptosis. Several studies shown that transfection of cancer cells with wild-type p53-expressing plasmids could directly drive cells into apoptosis and/or growth arrest, suggesting that a gene therapy approach for cancer treatment can be related to the re-establishment of the normal p53 function. Recently, the supercoiled (sc) conformation of a p53-encoding plasmid proved to be more efficient in cell transfection and protein expression than open circular conformation. Aiming to successfully isolate this bioactive isoform, several chromatographic techniques have been used, namely amino acids-based affinity chromatography. Concerning this chromatographic approach, in this doctoral work different amino acids like, Lmethionine, L-tyrosine, and arginine, were used to isolate the sc p53 encoding plasmid. From this work, it was achieved a better recovery yield and purity levels for O-Phospho-L-tyrosine when compared with L-methionine agarose matrix. Regarding the macroporous arginine resin, it was possible to recover the sc p53 encoding pDNA with high purity, and an increase of more than 50% in the dynamic binding capacity was achieved, when comparing with their homologous commercial agarose matrix. To understand the activity and the therapeutic effect induced by this sc isoform, different cell lines (HeLa, A549 and human dermal fibroblasts) were transfected with the pDNA purified either by the affinity purification strategy or with a commercial kit, for further in vitro evaluation. In particular, the cytotoxicity, the expression of the p53 transgene and the resulting apoptotic effect were evaluated in these in vitro cancer models. The results brought relevant information concerning the potential application of a sc p53 encoding plasmid in cancer gene therapy. To eliminate different cancer types, treatments must be applied systematically and therefore, must be targeted to cancer cells. Concerning this and, to enable an easy and safe systemic therapy, stable and non-viral gene vectors have been developed to encapsulate and deliver foreign genetic materials in specific cell types, such as cancerous cells. The use of non-viral vectors usually promotes low immune response, they are easily prepared, have a low production cost and also, they can be easily produced at large scale. Other important characteristic about these vectors is the ability to transfer different and large transgenes being also able to be stored for long periods due to their stability. Regarding this, in this doctoral work, chitosan (CH) and polyethyleneimine (PEI) were complexed with different plasmids in order to search for the suitable non-viral nanocomplex combination to be applied for gene therapy. Through the obtained results it was found that p53-encoding pDNA/PEI polyplexes demonstrate some toxicity in normal cells which could be a handicap for future therapeutic application of this nanocarriers. Also, from the track of the nanocarriers inside the cells, it was achieved a better transfection efficiency for the carriers delivering the smaller pDNA. The ability of the polyplexes to promote P53 protein expression was also evaluated using HeLa cancer cells and an increase of 54.2% and 32% of the P53 levels was achieved when CH and PEI nanocarriers were respectively applied. Overall, the scientific work performed in this thesis hopes to lead the scientific community to give more and more relevance to the use of the supercoiled pDNA isoform for gene therapy involving the reestablishment and restoration of the levels of p53. Moreover, it has been shown that the use of chromatography using specific amino acid ligands is a crucial factor in the final quality of the recovered sc pDNA sample, being this a predominant parameter for the accomplishment of the desired therapeutic results. Finally, the effort in the search and development of suitable non-viral vectors should stand up since it can guarantee the stability and activity of the sc p53 encoding plasmid during the delivery process.
- Application of dried blood spots for the determination of organophosphorus pesticides by GC-MS/MSPublication . Soares, Sofia Pires Seixo; Barroso, Mário Jorge Dinis; Alba, Maria Eugénia GallardoThe uncontrolled use of pesticides, for instance of organophosphorus nature, is an issue that has been affecting societies for a long time. As this is a current subject, and the access to these compounds is so facilitated, legislation has been put in place to monitor their use; furthermore, these compounds still appear in intoxication statistical data, and as such their detection and quantification in biological specimens is still requested to many laboratories, mainly in the clinical and forensic areas. The objective of this work was to develop and validate an analytical method for the detection and quantification of five organophosphorus pesticides (diazinon, chlorpyrifos, parathion-ethyl, chlorfenvinphos and quinalphos) in blood, using the dried blood spots (DBS) sampling approach for sample preparation and gas chromatography coupled to tandem mass spectrometry (GC-MS/MS). The internal standard used was ethion (ETH), and the entire extraction process was previously optimized. The developed method was fully validated according to internationally accepted guidelines for bioanalytical method validation, and the studied parameters included selectivity, linearity, limits of detection (LOD) and quantification (LLOQ), precision and accuracy, stability, dilution integrity, and recovery. Linearity was obtained in the range of 0.1-25 µg/mL for all compounds, except for diazinon (0.05-25 µg/mL) and quinalphos (0.25-25 µg/mL), with determination coefficients greater than 0.99. Intra- and interday precision revealed coefficients of variation (CVs) typically lower than 14%, while accuracy was within a ±12% interval from the nominal concentrations. Short-term stability (for 24h at room temperature), stability after 3 freeze/thaw cycles and long-term stability were studied, revealing that the analytes were stable under those conditions. Despite the low recoveries obtained (between 1 and 12%), the method was sensitive enough as to present limits of detection between 0.05 and 0.1 µg/mL. This is the first technique described using this extraction approach for these compounds, and its simplicity, sensitivity and speed allow its routine use in the laboratories for the detection and quantification of these organophosphorus pesticides in biological specimens.
- Avaliação da atividade anticancerígena de aptameros de DNA para terapia do cancro do colo do úteroPublication . Ribeiro, Márcia Filipa Pinto; Cruz, Carla Patrícia Alves Freire MadeiraO cancro do colo do útero é dos tipos de cancro mais frequentes nas mulheres e é causado por uma infeção com o vírus do papiloma humano (HPV). As terapias usadas neste tipo de patologia, tais como quimioterapia e radioterapia, não são seletivas provocando efeitos indesejados. Atualmente têm sido estudadas terapias mais seletivas, que têm como base a utilização de aptameros de G4 de DNA. Os aptameros de G4 são estruturas secundárias não canónicas de ácidos nucleicos, altamente ordenadas e que se formam a partir do enrolamento de sequências ricas em guaninas. Neste projeto estudou-se estruturalmente o aptamero G4 AT11 e os complexos por ele formados com derivados de laranja de acridina e de fenantrolinas em termos de estabilidade, afinidade, atividade anticancerígena e localização intracelular. Ensaios de dicroísmo circular confirmaram a formação da estrutura de G4 pelo AT11 e experiências de desnaturação térmica mostraram que os derivados de laranja de acridina C8 e C8-NH2 promovem uma maior estabilização térmica do aptamero G4 AT11 (?Tm > 20ºC) seguidos dos derivados de fenantrolinas (?Tm > 18ºC). Através de titulações por espectroscopia de fluorescência, obtiveram-se valores de afinidade do ligando-G4 AT11 moderados a altos, com resultados entre 1,60x10 -6 e 2,01x10-7 M-1 . Relativamente à atividade anticancerígena, o aptamero G4 AT11 mostrou ser mais citotóxico para células HeLa comparativamente às células NHDF; porém, os resultados mais promissores foram obtidos com os complexos ligando-G4 AT11, uma vez que os valores de viabilidade celular destes são menores nas HeLa e maiores nas NHDF quando comparados com os ligandos livres. A nível de localização celular, os resultados mostraram que o aptamero G4 AT11 localiza-se no citoplasma, o ligando C8 parcialmente no citoplasma e nucléolo, e o complexo por estes formado apenas a nível citoplasmático (com formação a partir das 24 h). Assim, conclui-se que a formação dos complexos aptamero G4 AT11-ligandos são uma estratégia promissora para terapia do cancro do colo do útero.
- Avaliação da Hipovitaminose D na População do Centro Hospitalar Universitário da Cova da BeiraPublication . Reis, Cristiana Fernandes; Teixeira, Rui Pedro Antunes Alves; Correia, Sara Carina de LimaA vitamina D é uma hormona esteroide lipossolúvel sintetizada maioritariamente na pele pela radiação ultravioleta (UVB) através do precursor 7-dehidrocolesterol ou de forma menos frequente obtida pela dieta. A primeira hidroxilação ocorre no fígado com a formação da 25- hidroxivitamina D, metabolito com pouca atividade, mas representativo das reservas desta hormona. A segunda hidroxilação pode ocorrer nos rins pela CYP27B1 com formação da 1,25- dihidroxivitamina D, metabolito ativo da vitamina D. A ação primária deste metabolito é através do recetor nuclear da vitamina D, VDR, que se heterodimeriza com o recetor X retinoide e se vai ligar a elementos responsivos da vitamina D próximos dos genes alvo. A função mais conhecida da vitamina D é a homeostase dos níveis de cálcio e fósforo bem como manter uma boa saúde óssea. Contudo há vários estudos que apontam para a associação da vitamina D a várias patologias, como doenças cardiovasculares, doenças autoimunes e doenças inflamatórias. Esta ampla distribuição clínica pode ser explicada pela expressão de recetores VDR e da enzima CYP27B1 em vários órgãos além dos rins. Para se dosear a vitamina D recorre-se ao 25-OHD havendo mais do que uma metodologia aplicada a esta medição. Vários têm sido os problemas levantados na escolha da metodologia, como a reatividade cruzada pelo 24,25-(OH)2D, um metabolito da vitamina D que permite que haja um controlo adequado nos níveis das restantes formas. Existem ainda um conjunto de fatores, para além do método usado, que podem interferir de forma negativa nos doseamentos, realçando a necessidade crescente de estudos adicionais. Neste projeto de investigação é feita uma análise estatística com base nos doseamentos dos últimos 4 anos através de um imunoensaio de eletroquimioluminescência no equipamento Cobas® 6000 (Roche). Este imunoensaio apresenta um anticorpo monoclonal que impede reações cruzadas com o metabolito 24,25-(OH)2D. Conclui-se assim nesta investigação que fatores como a estação do ano/meses interferem significativamente no doseamento ainda que a maioria permaneça em hipovitaminose D. Também o sexo parece ser um fator que intervém de forma significativa nos doseamentos, apesar da contestação por parte de um elevado número de estudos. A avaliação dos diagnósticos ainda carece de mais estudos, onde sejam avaliados outros parâmetros que podem desfazer várias dúvidas até ao momento sentidas.
- Avaliação da qualidade microbiológica de suplementos alimentares utilizados no contexto da prática desportivaPublication . Taborda, Vanda Marina Marques; Oliveira, Ana Cristina Palmeira de; Oliveira, Rita Manuela Palmeira deUma alimentação saudável e variada consegue fornecer ao organismo os nutrientes necessários para um estado de equilíbrio. Contudo, consoante o estilo de vida pode ser necessário completar essa alimentação, através de géneros alimentícios que constituem fontes concentradas de determinadas substâncias nutrientes ou com efeito nutricional, que são os suplementos alimentares. O rendimento desportivo é muito influenciado pela alimentação, sendo frequente a adoção de estratégias nutricionais de forma a aumentar a performance e a recuperação. Existem no mercado uma vasta variedade de suplementos alimentares e com finalidades muito diferentes. Os medicamentos e os suplementos alimentares apresentam regras e legislação diferentes. Contudo por vezes torna-se difícil estabelecer a fronteira entre estas classificações. A Direção-Geral de Alimentação e Veterinária (DGAV) é a autoridade competente e responsável pelo controlo dos suplementos alimentares. Estes não apresentam um controlo de qualidade tão rigoroso como o aplicado aos medicamentos, que são da responsabilidade da Autoridade Nacional do Medicamento e Produtos de Saúde (INFARMED). Existem poucos estudos sobre a avaliação da qualidade e segurança dos suplementos alimentares, incluindo a análise de parâmetros microbiológicos. A presença de microrganismos patogénicos em alimentos e suplementos alimentares é um problema de saúde pública. Com o aumento do consumo de suplementos alimentares torna-se necessário proceder a um maior controlo por parte dos mesmos. Com este estudo pretende-se avaliar a qualidade microbiológica de suplementos alimentares aplicados ao contexto desportivo e comercializados em Portugal. Pretende-se também comparar os resultados obtidos tendo em conta as especificações definidas para medicamentos. Este estudo foi feito com base nos ensaios de qualidade microbiológica segundo a respetiva monografia da Farmacopeia Europeia 9.0. Foram analisadas 25 amostras, tendo sido divididas em 6 categorias: gainers, proteína, bebidas energéticas, aminoácidos, creatina e dextrose. Os resultados foram obtidos em número de unidades formadoras de colónias (UFC)/g de amostra, sendo estes resultados para aeróbios totais expressos em TAMC (contagem microbiana de aeróbios totais) e os resultados para fungos e leveduras totais expressos em TYMC (contagem combinada de fungos e leveduras totais) , tendo sido ambos comparados com os critérios de qualidade microbiológica de formas farmacêuticas não estéreis, incluindo-se as amostras deste estudo nas preparações não aquosas para uso oral. Os resultados da análise da qualidade microbiológica das 25 amostras evidenciaram que nenhuma estava fora dos limites estipulados para aeróbios totais, contudo em 7 destas amostras o valor limite estipulado para fungos e leveduras totais foi ultrapassado. Foi feita uma análise à rotulagem das amostras com base nos requisitos definidos por lei que revelou que 7 das 25 amostras não cumpriam a apresentação da totalidade dos requisitos. Ao contrário do que acontece com os produtos farmacêuticos, a ausência de especificações microbiológicas e das normas de Boas Práticas de Fabrico bem definidas contribui para o não cumprimento de critérios de qualidade estipulados para produtos farmacêuticos. É também importante a monitorização do cumprimento da legislação relativa aos rótulos de modo a garantir que o consumidor tem acesso a uma informação completa.
- Avaliação de alguns métodos de extração de substâncias bioativas de microalgasPublication . Martíns, Cahilo Manuel; Simões, Rogério Manuel dos Santos; López Rodilla, Jesus MiguelAs microalgas têm sido objecto de muitos estudos nos últimos anos tendo em vista a sua aplicabilidade nas indústrias de alimentos e farmacêutica, nas áreas da biomedicina e ambiental, bem como na produção de energia renovável. As aplicações ambientais das microalgas incluem a bio-fixação de CO2, a remoção de matéria orgânica e metais tóxicos de efluentes, a produção de biocombustíveis como biodiesel e bioetanol. De entre as microalgas estudadas, a Chlorella tem apresentado grande potencial de utilização em todos esses sectores, com destaque especial na área de saúde. No presente trabalho realizou-se o crescimento da microalga Chlorella vulgaris, testaram-se alguns métodos de extracção de lípidos e identificaram-se alguns desses compostos presentes na biomassa algas, utilizando a técnica de cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massa.
- Bioanalytical tools for unraveling part of the puzzle of the biochemical phenomena in epilepsy: neuromediators and antiepileptic drugsPublication . Fonseca, Beatriz Marques da; Alves, Gilberto LourençoThe earliest descriptions of epilepsy date back to 3000 years B.C., which was, throughout history, linked to divine factors, and only in the mid-nineteenth century it was widely accepted as a pathology originating in the brain. Thus, summarily, epilepsy is a disease of the brain involving recurrent unprovoked seizures, which arise due to an abnormal excessive or synchronous neuronal activity. Although the scientific knowledge has evolved tremendously over the last decades, particularly in the field of neurosciences, it is believed that we are still far from knowing in detail the neurobiochemical and molecular phenomena intrinsic to the complexity of the processes underlying this disease. In fact, a deeper understanding of the mechanisms that lead to the development of epilepsy (epileptogenesis) and those underlying the ictogenesis will be certainly favorable to find novel therapeutic approaches, capable of improving the suppression of seizures, particularly in patients who develop phenotypes of drug-resistant epilepsy, but also capable of modifying, and if possible interrupting, the cascade of molecular, structural and functional pathophysiologic changes that occur in brain during epileptogenesis. Given the scarcity of information on the neurobiological phenomena underlying the pharmacological response, as well as on the biochemical and molecular processes responsible for drug resistance and epileptogenesis, new studies are imperative to contribute to increase knowledge about these topics. The involvement of neuromediators in the initiation and spread of epileptic seizures is an increasingly recognized reality and the quantitative determination of these endogenous substances will be fundamental to improve our knowledge at neurobiochemical level, thus enabling a better understanding of the etiopathogenesis of epilepsy and the mechanisms of action of antiepileptic drugs as well. Therefore, in this context, bioanalysis will play a vital role in supporting and helping to interpret the results obtained from many research studies developed in this field. Consequently, the global aim of this doctoral project was to developed simple and reliable bioanalytical tools for the determination of a series of key neuromediators involved in the neurotransmission and neuronal excitability. In addition, the development of a novel bioanalytical tool to simultaneously quantify important antiepileptic drugs and some widely used chemoconvulsant agents was also considered. Thus, the research work supporting this doctoral thesis began with the development and full validation of an analytical technique of high-performance liquid chromatography coupled to fluorescence detection (HPLC-FLD) for the simultaneous quantification of several catecholamines and related endogenous compounds (i.e., dopamine, norepinephrine, epinephrine, homovanillic acid, levodopa and 3-O-methyldopa) in rat brain tissue. Posteriorly, another methodology using the same analytical system (HPLC-FLD) was also developed for the determination of five neuroactive amino acids (i.e., glutamate, aspartate, taurine, glutamine and gamma-aminobutyric acid) in rat brain tissue; however, in this case, a precolumn derivatization step was required because these amino acids do not have native fluorescence. Moreover, to perform more integrated analyses of the anticonvulsant and convulsant effects in nonclinical studies it will be essential the availability of bioanalytical tools that enable the simultaneous determination of the target antiepileptic drugs and convulsant agents. Therefore, within the scope of this thesis, it was also developed a liquid chromatography method coupled to diode array detection for the simultaneous determination, in plasma and rat brain samples, three established antiepileptics (levetiracetam, zonisamide and lamotrigine) and two important chemoconvulsant agents (pentylenetetrazole and pilocarpine) frequently used to experimentally induce acute seizures and/or chronic epilepsy in whole-animal models. This set of bioanalytical tools may allow the study of neurochemical changes that occur in several brain regions associated with epilepsy and/or epileptic seizures, and thus can help to understand multiple aspects still unclear in the field of neurosciences. Hence, the achievements obtained with the work presented in this doctoral thesis may provide quantitative support for future nonclinical studies aimed at deepening the knowledge about the neurobiochemical mechanisms underlying the epileptogenesis and ictogenesis phenomena, as well as the action of antiepileptic drugs and chemoconvulsant agents. Finally, this work represents a small but useful contribution to unravel part of the puzzle of the complex neurobiochemical mechanisms involved in epilepsy.
- Cancer gene therapyPublication . Neves, Ana Raquel Bastos; Costa, Diana Rita Barata; Sousa, Ângela Maria Almeida deCancer is one of the major causes of morbidity and mortality worldwide. It involves genetic changes that affect a variety of genes, namely tumour suppressor genes. The traditional approaches for cancer treatment include chemotherapy, surgery and radiation. Chemotherapy represents the main choice of treatment in most cases, however, traditional therapies seemed unvalued to fight against metastasis, recurrence of tumour, and the treatment of advanced cancer. Therefore, new strategies need to be developed to increase therapy efficacy. Gene therapy has brought a promising and unique approach to medicine because of its wide application in the treatment of various diseases, including hereditary diseases to acquired (infection or cancer) pathologies. p53 suppressor gene mutation or degradation is found in more than 50% of human cancers, therefore, gene therapy protocols focussed on the restauration of p53 protein are a priority in this field. For gene therapy viability in a clinical setting, the development of an efficient gene delivery system is imperative. The conception of delivery systems based on cell penetrating peptides represents an incredible asset and may deeply contribute for the evolution of cancer therapy. In this context, a new system for p53 encoding plasmid DNA (pDNA) delivery based on RALA peptide was designed and developed in order to produce a suitable intracellular delivery platform capable of gene delivery and restoration of p53 levels within the cancer cells. These carriers were characterized in terms of morphology, size, surface charge, loading and encapsulation efficiency and the fine structure was analyzed by Fourier-transformed infrared (FTIR) spectroscopy. The results showed that formed nanoparticles are suitable for cell uptake, internalization and gene release. Furthermore, stability studies demonstrated that RALA is capable of protect encapsulated DNA from serum nucleases and MTT assay showed that these systems are biocompatible. Confocal microscopy and live cell imaging experiments confirmed intracellular localization of nanoparticles, resulting in enhanced sustained pDNA uptake. Moreover, in vitro transfection of HeLa cells mediated by RALA/pDNA vectors allowed the detection of mRNA transcripts by RT-PCR and p53 protein expression by Western Blot. An ELISA kit assay quantified the produced protein levels. From these progresses, apoptosis in cancer cells was investigated. Caspase 3 activation was monitored by means of colorimetric assay and TUNEL assay enabled to confirm nuclear DNA fragmentation post transfection with the carriers. Lastly, a western blot assay with BAX antibody permitted to figure out which apoptosis pathway is responsible for cancer cells death. Taken together, the presented results revealed that the RALA/pDNA vector seems to be suitable as an innovative platform for p53 mediated cancer gene therapy.